兔卵丘細胞對卵母細胞體外成熟與孤雌發(fā)育的影響.pdf

1、　　兔是重要的實驗動物，其卵母細胞是胚胎工程技術(shù)操作的重要材料。本論文以新西蘭兔為實驗動物研究了卵母細胞復(fù)合體(COCs)對卵母細胞核成熟、胞質(zhì)成熟以及卵母細胞存活和退化等方面的影響作用。采集兔卵母細胞復(fù)合體(COCs)和裸卵(NOs)。將COCs脫去部分或全部卵丘細胞，形成放射冠包裹的卵母細胞(COs)或機械裸卵(DOs)后，分五種方式培養(yǎng)，即卵丘細胞包裹的卵母細胞(CEOs)的單獨培養(yǎng)、COs單獨培養(yǎng)、DOs與COCs共培養(yǎng)(DOs

2、(COCs))、DOs與卵丘顆粒細胞共培養(yǎng)的(DOs(CCs))，以及DOs單獨培養(yǎng)，培養(yǎng)24h或30h后，統(tǒng)計核成熟率。對核成熟的卵母細胞孤雌激活后用卵裂率判斷卵母細胞成熟效果。得到如下結(jié)果： (1)培養(yǎng)24h，上述五種培養(yǎng)方式的卵母細胞核成熟率分別為76﹪、46﹪、13﹪、7﹪和6﹪，孤雌激活后卵裂率分別為68﹪、63﹪、35﹪、21﹪和17﹪，前兩種培養(yǎng)方式均高于后三種培養(yǎng)方式。(2)培養(yǎng)30h，上述五種培養(yǎng)方式核成熟率分

3、別為82﹪、62﹪、24﹪、16﹪和7﹪，都有顯著差異(P＜0.05)。孤雌激活后的卵裂率分別為79﹪、76﹪、61﹪、45﹪和28﹪，前兩種培養(yǎng)方式顯著高于后三種培養(yǎng)方式(P＜0.05)。(3)培養(yǎng)時間從24h延長至30h，DOs(COCs)的核成熟率顯著提高，孤雌激活后的卵裂率也顯著提高。DOs(CCs)的核成熟率顯著提高，但胞質(zhì)成熟率無顯著差異(P＞0.05)。(4)NOs和NOs(CCs)成熟24h，核成熟率都為2﹪，培養(yǎng)至30

4、h，NOs和NOs(CCs)核成熟率分別為2﹪和3﹪，無顯著差異(P＞0.05)。(5)培養(yǎng)24h，CEOs、COs、DOs(COCs)、DOs(CCs)和DOs退化率分別為7﹪、23﹪、44﹪、64﹪和73﹪，相互間差異均顯著(P＜0.05)；培養(yǎng)至30h，退化率分別為12﹪、20﹪、41﹪、60﹪和77﹪，相互間均差異顯著(P＜0.05)。但培養(yǎng)24h與培養(yǎng)30h，相同培養(yǎng)方式下卵母細胞退化率均無顯著差異(P＞0.05)。以上結(jié)果表