西瓜高效離體再生體系建立及玻璃化現(xiàn)象研究.pdf

1、SichuanAgriculturalUniversityMasterDissertationEstablishmentofefficientregenerationsystemofwatermeloninvitroandstudyonvitrificationByYonghongXie(VegetableScience)DirectedbyHUanxiuLiSichuanAgriculturalUniversity，Chengdu，6

2、11130Sichuan，PRChinaJune，2016June2010，摘要本試驗(yàn)以4個(gè)西瓜品種‘早春紅玉’、‘早佳8424’和‘抗病京欣’以及實(shí)驗(yàn)室品種編號(hào)‘F27’西瓜幼苗為材料，主要研究了西瓜離體再生過(guò)程中外植體滅菌方式、基因型、苗齡、外植體類型、各階段培養(yǎng)基中激素種類和濃度等因素的影響。初步探討了降低西瓜不定芽玻璃化率各因素的優(yōu)化，以建立西瓜的高效低玻璃化離體再生體系，為西瓜的遺傳轉(zhuǎn)化和新品種選育提供參考。本試驗(yàn)主要研究結(jié)果

3、如下：1西瓜高效離體再生體系的建立(1)直接從西瓜種子催芽后長(zhǎng)出的幼苗上獲得外植體可以提高外植體供給速度，提高效率。外植體在75％酒精滅菌30s后轉(zhuǎn)入O1％HgCl2滅菌處理10min能有效降低外植體污染率和死亡率，是本試驗(yàn)最佳滅菌組合。(2)不同基因型的西瓜外植體之間誘導(dǎo)情況差異顯著。同樣誘導(dǎo)培養(yǎng)條件下，抗病京欣的不定芽誘導(dǎo)率和平均誘導(dǎo)芽數(shù)分別達(dá)8254％、493，其次是早佳8424、F27，誘導(dǎo)情況最差的是早春紅玉。(3)不同苗齡的

4、外植體不定芽誘導(dǎo)情況不同，子葉剛剛由黃色轉(zhuǎn)為淺綠色的變色期時(shí)誘導(dǎo)率最高。而由于外界環(huán)境條件和種子自身情況的不同，變色期子葉在不同苗齡階段均有分布。因此，本試驗(yàn)中以變色期來(lái)確定外植體生長(zhǎng)發(fā)育情況而非生長(zhǎng)日期排除了外界條件的影響，獲得了更高的誘導(dǎo)率。(4)本試驗(yàn)中抗病京欣的頂芽和子葉近軸端兩種外植體的不定芽誘導(dǎo)率均達(dá)到85％以上，但子葉近軸端誘導(dǎo)的不定芽生長(zhǎng)健壯，誘導(dǎo)率高，并且便于遺傳轉(zhuǎn)化，為本試驗(yàn)的最佳外植體。(5)外植體在只添加6BA的

5、培養(yǎng)基中也能誘導(dǎo)產(chǎn)生不定芽，但是濃度過(guò)高會(huì)使不定芽玻璃化情況加重，應(yīng)控制在4mg／L以內(nèi)。2，4D對(duì)西瓜不定芽誘導(dǎo)具有明顯抑制作用，添加2，4一D后不定芽誘導(dǎo)率明顯下降。當(dāng)6BA配合低濃度生長(zhǎng)素nA或NAA時(shí)比單獨(dú)使用能獲得更高的誘導(dǎo)率，且IAA效果優(yōu)于NAA，最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基激素組合為6BA30mg／LIAA02mg／L，誘導(dǎo)率達(dá)9165％，不定芽平均誘導(dǎo)芽數(shù)達(dá)636。(6)不定芽轉(zhuǎn)入添加KT的培養(yǎng)基中能獲得很好的伸長(zhǎng)效果，最適濃度為K