Damas1869李離體繁殖及再生體系建立.pdf

1、Damas1869李是法國農(nóng)科院波爾多農(nóng)業(yè)研究中心培育的砧木品種，具有較好的抗?jié)承?，且與大部分桃嫁接親和性良好。為此建立了穩(wěn)定高效的Damas1869李離體快繁體系，并在此基礎(chǔ)上，研究了不同因素對不定芽的影響，以建立高效的再生技術(shù)體系，為遺傳轉(zhuǎn)化和創(chuàng)新種質(zhì)研究奠定基礎(chǔ)。主要結(jié)果如下：
　　 1.離體快繁
　　 ①用冬季及春季兩種不同來源的Damas1869李的芽進行比較試驗，結(jié)果表明，以冬季休眠枝條的水培嫩芽為外植體材料

2、較好，成活率為64.0％；最佳滅菌方法是75％酒精消毒10s，再20％NaClO消毒8m，創(chuàng)建無菌體系。
　　 ②最佳芽增殖培養(yǎng)條件是MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L+20.0g/L蔗糖+5.0g/L瓊脂粉，培養(yǎng)室溫度為25±1℃，光照強度2000Lx，光照時間14h/d，增殖系數(shù)最高可達7.1。
　　 ③最適宜生根培養(yǎng)基是1/2MS+IBA2.0mg/L+20.0g/L蔗糖+5.0g/L瓊脂粉+0.0

3、5％活性炭，生根率為87.8％，平均生根數(shù)3.9。
　　 ④移栽時增殖苗先在低濃度激素條件下連續(xù)繼代2次，選用株高大于4cm的苗，移栽到草炭土∶珍珠巖∶蛭石=1∶1∶1(體積比)的基質(zhì)中，移栽后7d內(nèi)用塑料薄膜覆蓋保濕，7d后逐漸揭膜透氣，最高成活率可達90％。
　　 2.葉片再生
　　 以Damas1869李試管苗幼嫩葉片為試材，采用正交試驗設(shè)計，對影響離體葉片再生的基本培養(yǎng)基、外源細胞分裂素(TDZ、6-BA

4、)和生長素(IBA、NAA)濃度組合、培養(yǎng)基中瓊脂用量和葉片生理狀態(tài)等方面的關(guān)鍵因素進行了研究。結(jié)果表明：
　　 ①Damas1869李試管苗幼嫩葉片以F14基本培養(yǎng)基再生效果最好，優(yōu)于MS和WPM培養(yǎng)基。
　　 ②最佳激素配比是TDZ4.0mg/L+IBA0.5mg/L，以繼代增殖幼嫩葉片再生能力最高。
　　 ③以5d的暗培養(yǎng)后光照培養(yǎng)，4.5g/L瓊脂配制偏軟的再生培養(yǎng)基有利于提高離體葉片的再生效率。所建立的