急慢性應(yīng)激對小鼠空間學習記憶功能的影響及腦內(nèi)Wnt3a的表達.pdf

1、研究目的與方法：
　　本研究急性應(yīng)激模型的建立是通過對小白鼠進行足底電擊作為唯一應(yīng)激源；慢性應(yīng)激模型的建立是通過7種不同的應(yīng)激源（包括冰水游泳、通宵照明、斜籠擁擠、禁食、高臺、禁水、電擊，每天隨機從中選擇1種應(yīng)激方式，總共持續(xù)21天）。研究急性應(yīng)激作用和慢性應(yīng)激作用對小白鼠自發(fā)行為和空間學習記憶能力的影響，以及腦內(nèi)Wnt3a和β-catenin表達的變化。實驗小白鼠的行為學觀察和檢測，以及空間學習記憶能力的檢測分別通過曠場實驗和M

2、orris水迷宮實驗方法；通過HE染色技術(shù)和免疫組織化學染色技術(shù)檢測小白鼠腦內(nèi)各區(qū)的神經(jīng)元形態(tài)結(jié)構(gòu)及Wnt3a和β-cantenin的表達。
　　研究結(jié)果：
　　1.曠場實驗結(jié)果:急性應(yīng)激組小白鼠與對照組小白鼠相比，在急性應(yīng)激后立即，應(yīng)激組小白鼠直立次數(shù)和爬行格數(shù)均明顯提高，糞便粒數(shù)和中心格停留時間有明顯的減少，而修飾次數(shù)無明顯變化；在急性應(yīng)激停止后一周，兩組比較各項指標無顯著差異。慢性應(yīng)激組小白鼠與對照組小白鼠相比，應(yīng)激組

3、小白鼠的直立次數(shù)和爬行格數(shù)均顯著減少，而中心格停留時間顯著提高；而在慢性應(yīng)激停止后一周，兩組小白鼠的穿越格數(shù)、直立次數(shù)、修飾次數(shù)、糞便粒數(shù)都有顯著性差異，但中心格停留時間差異不顯著。
　　2.Morris水迷宮實驗結(jié)果：急性應(yīng)激組小白鼠與對照組小白鼠相比，在定位航行實驗中，急性應(yīng)激實驗小白鼠搜尋平臺的逃避潛伏期明顯縮短；在空間搜索實驗中，急性應(yīng)激實驗小白鼠在目標象限（即有平臺的象限）游泳時間明顯提高。急性應(yīng)激停止一周后的數(shù)據(jù)差異不

4、顯著。慢性應(yīng)激組小白鼠與對照組小白鼠相比，在定位航行試驗中，慢性應(yīng)激實驗小白鼠尋找平臺的逃避潛伏期明顯提高。慢性應(yīng)激停止后一周，除了在第二周期有明顯差異，其他三個周期差異不明顯?？臻g搜索實驗中，應(yīng)激組小白鼠在目標象限的游泳時間明顯減少；慢性應(yīng)激停止后一周差異不明顯。
　　3.HE染色實驗結(jié)果：急性應(yīng)激組小白鼠與對照組小白鼠相比，神經(jīng)元形態(tài)結(jié)構(gòu)無明顯變化；一周后差異不明顯。而慢性應(yīng)激組小白鼠與對照組小白鼠相比，海馬和前腦皮層的神經(jīng)元

5、數(shù)目變化較明顯，細胞著色顏色淺，并且染色不均勻，細胞發(fā)生萎縮變形，出現(xiàn)了不同程度的損傷情況；應(yīng)激停止后一周有所恢復(fù)。
　　4.免疫組化實驗結(jié)果：急性應(yīng)激組小白鼠和對照組小白鼠，在應(yīng)激后立即和應(yīng)激后一周，海馬各區(qū)均未見明顯的Wnt3a和β-catenin陽性細胞表達，且差異不明顯，平均目標灰度值差異也不明顯；而在前腦皮層中，均可見Wnt3a和β-catenin陽性細胞明顯表達。應(yīng)激組小白鼠與對照組比較，在急性應(yīng)激后立即，前腦皮層Wn

6、t3a和β-catenin陽性細胞數(shù)增多且差異顯著，應(yīng)激后一周差異不顯著。慢性應(yīng)激中，在應(yīng)激后立即和應(yīng)激后一周，應(yīng)激組和對照組小白鼠海馬各區(qū)均未見Wnt3a和β-catenin陽性細胞明顯表達；而在前腦皮層中，均可見Wnt3a和β-catenin陽性細胞表達，與對照組小白鼠比較，應(yīng)激組小白鼠Wnt3a陽性細胞數(shù)表達明顯較少，β-catenin也明顯減少。
　　研究結(jié)論：
　　1.急性應(yīng)激作用使小白鼠的曠場行為增強，空間學習記

7、憶能力增強；而慢性應(yīng)激作用使小白鼠的曠場行為下降，明顯損傷實驗小白鼠的空間學習記憶能力。
　　2.急性應(yīng)激作用對小白鼠的神經(jīng)元形態(tài)結(jié)構(gòu)無明顯影響；慢性應(yīng)激作用則會導(dǎo)致小白鼠海馬和前腦皮層神經(jīng)元形態(tài)發(fā)生變化。
　　3.急性應(yīng)激和慢性應(yīng)激作用中，在小白鼠海馬均未見Wnt3a和β-catenin明顯表達；而急性應(yīng)激作用導(dǎo)致小白鼠前腦皮層Wnt3a和β-catenin表達顯著上調(diào)，慢性應(yīng)激作用導(dǎo)致小白鼠前腦皮層Wnt3a和β-cat