LIMK2在乳腺癌侵襲轉(zhuǎn)移中的作用及機(jī)制研究.pdf

1、在全世界女性的所有惡性腫瘤中，乳腺癌的發(fā)病率位居第一。盡管中國女性乳腺癌的發(fā)病率相對較低，但近年來，其發(fā)病率的增長速度逐年加快，是全世界的兩倍多，城市地區(qū)尤著。侵襲和轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤主要的不良特征。許多癌癥患者的死因也正是此。但目前對乳腺癌侵襲和轉(zhuǎn)移的具體作用機(jī)制尚不完全清楚。因此，進(jìn)一步明確其具體機(jī)制，對乳腺癌的治療和預(yù)防具有重要的意義。惡性腫瘤從形成到擴(kuò)散、轉(zhuǎn)移的過程是一個(gè)多水平、多因素參與的極其復(fù)雜的過程。其中癌基因在乳腺癌發(fā)生、發(fā)

2、展中具有關(guān)鍵的作用。因此，深入研究癌基因的功能，可以為認(rèn)識惡性腫瘤的形成、侵襲和轉(zhuǎn)移的具體機(jī)制;尋找最為有效的靶向治療等提供有效幫助。
　　LIMK2有促進(jìn)形態(tài)發(fā)生，細(xì)胞增殖，黏附，遷移，分化和炎癥作用。在人類許多惡性腫瘤組織中都檢測到LIMK的過表達(dá)。目前，乳腺癌組織中LIMK2的表達(dá)情況、LIMK2與腫瘤臨床病理參數(shù)及患者預(yù)后的關(guān)系仍無統(tǒng)一意見。而且，對LIMK2的調(diào)控機(jī)制知之甚少。
　　針對以上問題，本研究試圖運(yùn)用免疫

3、組化(IHC，immunohistochemistry)的方法，檢測了我科212例乳腺腫瘤組織標(biāo)本中LIMK2蛋白的表達(dá)情況，探討LIMK2與腫瘤臨床病理參數(shù)及患者的預(yù)后是否有關(guān)聯(lián)。采用qPCR和western blot、過表達(dá)和干擾等技術(shù)初步探討LIMK2在乳腺癌中的生物學(xué)作用及分子機(jī)制。通過上述實(shí)驗(yàn)試圖初步闡述在乳腺癌侵襲轉(zhuǎn)移過程中LIMK2所起的作用及其作用機(jī)理，為初步揭示LIMK2在乳腺癌中的侵襲性行為提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)據(jù)，探討LIM

4、K2是否能作為治療乳腺癌的新的分子靶點(diǎn)。
　　方法和結(jié)果:
　　1.乳腺惡性腫瘤標(biāo)本中LIMK2與患者臨床病理參數(shù)和預(yù)后的關(guān)聯(lián)
　　方法:運(yùn)用免疫組化(IHC)的方法，檢測了我科212例乳腺腫瘤組織標(biāo)本中LIMK2蛋白的表達(dá)情況，探討LIMK2與腫瘤臨床病理參數(shù)及患者的預(yù)后是否有關(guān)聯(lián)。
　　結(jié)果:LIMK2主要表達(dá)于乳腺癌細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)，很少見于細(xì)胞核中。LIMK2的表達(dá)與患者年齡、ER、PR和HER-2狀態(tài)無關(guān)(

5、P＞0.05)。但是，LIMK2高表達(dá)與腫瘤大小、組織學(xué)分級和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)(P＜0.001)。乳腺癌患者中高表達(dá)LIMK2較低表達(dá)LIMK2者其生存率顯著降低。另外，腫瘤大小(HR:5.27;95％CI:1.61-17.20;P=0.01），TNM分期（HR:1.84;95％CI:1.01-3.33;P=0.04）和LIMK2高表達(dá)(HR:2.83;95％CI:1.63-4.93;P=0.00)是乳腺癌患者的重要預(yù)后因素。在乳腺癌的發(fā)

6、生和進(jìn)展中，LIMK2可能起重要作用。LIMK2是乳腺癌預(yù)后不良的重要因素之一。
　　2.LIMK2在乳腺癌侵襲、轉(zhuǎn)移中的作用及作用機(jī)制的初步探討
　　方法:
　　利用基因敲低和過表達(dá)、qPCR、western blot等技術(shù)，檢測LIMK2對乳腺癌侵襲轉(zhuǎn)移的作用，及探尋相關(guān)作用機(jī)制。
　　結(jié)果:
　　1.MCF-7、SUM159、MDA-MB-231細(xì)胞中均表達(dá)LIMK2，其中以SUM159細(xì)胞表達(dá)最高，

7、MDA-MB-231細(xì)胞次之，MCF-7細(xì)胞表達(dá)最低;2.LIMK2在乳腺癌中是促癌基因，在敲低LIMK2后，乳腺癌的增殖、遷移、侵襲能力均減弱，而過表達(dá)后，乳腺癌的增殖、遷移、侵襲能力均增強(qiáng);3.LIMK2可增加乳腺癌細(xì)胞的增殖、侵襲和遷移，作用途徑有可能是通過失活下游分子cofilin而實(shí)現(xiàn)的。
　　結(jié)論:
　　1、LIMK2可增加乳腺癌細(xì)胞的增殖、侵襲和遷移，與乳腺癌的惡性程度相關(guān)。LIMK2可能是乳腺癌形成、發(fā)展中的

8、癌基因。依據(jù)有:①LIMK2的高表達(dá)與乳腺癌的腫瘤大小、組織學(xué)分級和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。乳腺癌患者中高表達(dá)LIMK2較低表達(dá)LIMK2者其生存率顯著降低。LIMK2是乳腺癌預(yù)后不良因素之一。②在侵襲力較強(qiáng)的三陰性乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞和SUM159細(xì)胞中，LIMK2的表達(dá)水平較高。而在惡性程度相對較低的乳腺癌MCF-7細(xì)胞中，LIMK2的表達(dá)水平較低。③敲低LIMK2后可減少M(fèi)DA-MB-231細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲潛能。而在MCF