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1、本研究分別構(gòu)建了強(qiáng)免疫佐劑霍亂毒素B亞單位(choleratoxinBsubunit,CTB)與胰島素原(proinsulin,PROIN)和胰島素B鏈(insulinBchian,INSB)的融合基因CTB-PROIN、CTB-INSB,探索了利用馬鈴薯生產(chǎn)1型糖尿病口服疫苗的可能性,主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下: 1.首先將融合基因CTB-PROIN、CTB-INSB克隆到大腸桿菌表達(dá)載體pET-30a(+)中,并誘導(dǎo)其表達(dá)。大
2、腸桿菌表達(dá)的融合蛋白CTB-PROIN和CTB-INSB可與GM1糖苷脂結(jié)合,并具備CTB和胰島素的雙重抗原性。 2.在此基礎(chǔ)上,分別構(gòu)建了含有土豆塊莖特異性啟動(dòng)子Patatin、融合基因、馬鈴薯蛋白酶抑制劑基因Ⅱ(Pin2)的3’末端非翻譯區(qū)(UTR)序列和NOS終止子的兩個(gè)植物轉(zhuǎn)化載體,通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化馬鈴薯,并獲得含有融合基因的轉(zhuǎn)基因馬鈴薯植株。轉(zhuǎn)基因植物表達(dá)的融合蛋白具有霍亂毒素和胰島素的雙重抗原性,可于神經(jīng)節(jié)苷脂
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