miRNA-155調控NSCLC細胞株MMPs表達及影響其侵襲轉移能力的研究.pdf

1、目的：研究miR-155對非小細胞肺癌(NSCLC)細胞株基質金屬蛋白酶(MMPs)的表達，以及對NSCLC細胞株形態(tài)、增殖、侵襲和轉移能力的影響。
　　方法：
　　(1)將miR-155 mimic、NC、miR-155 inhibitor、inhibitor NC用Lipofectamine2000分別轉染入A549、H1299、H460細胞株中。
　　(2) Real time PCR技術檢測miR-155以及M

2、MPs mRNA水平的變化。
　　(3) ELISA技術檢測MMPs蛋白表達水平的變化。
　　(4)顯微鏡下觀察 miR-155對細胞形態(tài)的影響；MTT分析 miR-155對細胞增殖的影響；Transwell、劃痕實驗分析miR-155對細胞侵襲轉移能力的影響。
　　(5) A549細胞株接種建立裸鼠移植瘤模型。成瘤后，瘤內注射miR-155 mimic、inhibitor和對照，每5天轉染一次，共轉染5次。每3天測量

3、腫瘤組織大小。最后一次轉染后3天處死裸鼠，眼眶取血，分離血清；剝離腫瘤組織稱重，勻漿，提取總RNA。
　　結果：
　　(1) miR-155的mimic和inhibitor可改變NSCLC細胞株中miR-155表達水平。
　　(2) miR-155過表達可促進NSCLC細胞株增殖，提高其侵襲轉移能力。
　　(3) miR-155可增強A549細胞株中MMPs mRNA表達水平，其中，對MMP-2、MMP-7、MM

4、P-9、MMP-10影響較大。
　　(4) miR-155過表達可提高A549、H1299、H460細胞株中MMP-2、MMP-7、MMP-9 mRNA和蛋白表達水平。
　　(5)裸鼠移植瘤實驗中miR-155 mimic處理組瘤體較其陰性對照組大，證實miR-155對裸鼠移植瘤的生長有促進作用，可影響瘤體組織中MMP-2、MMP-7、MMP-9的表達水平，miR-155可提高MMP-2、MMP-7、MMP-9 mRNA表達