SATB1在不同侵襲潛能肝癌細(xì)胞株的表達(dá)研究.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)2009級(jí)碩士學(xué)位論文SATBl在不同侵襲潛能肝癌細(xì)胞株的表達(dá)研究ExpressionAnalysisofSATB1AmongHepatocellularCarcinomaCellLineswithDistinctAggressivePhenotype課題來(lái)源：廣東省自然基金(10151051501000120)專(zhuān)業(yè)名稱(chēng)學(xué)位申請(qǐng)人指導(dǎo)教師答辯委員會(huì)主席答辯委員會(huì)成員論文評(píng)閱人肝膽外科李光輝楊定華教授梁力建教授霍楓教授陳亞進(jìn)教

2、授周杰教授闞和平副教授郭榮平教授周元平教授中文摘要realtimefluorescencequantitativePCR、RTPCR方法對(duì)六種細(xì)胞株SATB1mRNA表達(dá)水平進(jìn)行分析，并以2ZXACT相對(duì)定量方法處理realtimefluorescencequantitativePCR所得數(shù)據(jù)；采用Westernblotting分析六種細(xì)胞株SATBl蛋白表達(dá)水平，用ImageJ軟件測(cè)量蛋白條帶光密度值；采用免疫熒光方法對(duì)SATBl在細(xì)

3、胞內(nèi)的表達(dá)進(jìn)行定位及定性分析，并用激光共聚焦顯微鏡采集圖片。結(jié)果RealtimefluorescencequantitativePCR結(jié)果顯示：相對(duì)于人永生化肝細(xì)胞株HL7702，SATBlmRNA在5種肝癌細(xì)胞株中都有較高程度的表達(dá)，其表達(dá)水平因細(xì)胞株侵襲性不同而異(F=1590，P0001)。其中高轉(zhuǎn)移潛能的肝癌細(xì)胞株HCCLM3、MHCC97HSATBlmRNA呈現(xiàn)高表達(dá)，相對(duì)表達(dá)量分別為531140、565128(P=0604)

4、，低轉(zhuǎn)移潛能肝癌細(xì)胞株MHCC97LSATBlmRNA呈現(xiàn)較低表達(dá)，相對(duì)表達(dá)量為391O70，無(wú)轉(zhuǎn)移潛能的肝癌細(xì)胞株HepG2、SMMC7721SATBlmRNA表達(dá)水平最低，相對(duì)表達(dá)量為240060、253072((P=0846)。高轉(zhuǎn)移潛能的肝癌細(xì)胞株SATBlmRNA表達(dá)水平，相當(dāng)于無(wú)轉(zhuǎn)移能力肝癌細(xì)胞株235倍。RTPCR圖片未見(jiàn)含有雜帶非特異性擴(kuò)增的現(xiàn)象，GAPDH條帶均一。從條帶趨勢(shì)結(jié)果分析，在轉(zhuǎn)錄水平，不同侵襲潛能的肝癌細(xì)胞

5、株SATBlmRNA表達(dá)水平差異大。隨著細(xì)胞株侵襲性的增加，其相應(yīng)圖片擴(kuò)增條帶亮度增強(qiáng)，說(shuō)明表達(dá)水平增高。Westernblotting分析細(xì)胞株之間SATBl蛋白水平表達(dá)差異，膠片掃描儀采集圖片。ImageJi貝lJ量蛋白條帶光密度值，并分別以HL7702、HepG2、SMMC7721、MHCC97L、MHCC97H、HCCLM3目的條帶與內(nèi)參條帶光密度值的比值作為蛋白相對(duì)表達(dá)量，依次為01800002；02710002；035100