基于“藥效-配比”關(guān)系研究開心散類方的抗抑郁作用.pdf

1、開心散類方由“遠(yuǎn)志、人參、茯苓、石菖蒲”四味藥材組成，始載于《千金要方-卷十四》，還包括了《備急千金要方》之定志小丸、《古今錄驗(yàn)》之定志丸、《醫(yī)心方》之開心散、《千金翼》之補(bǔ)心湯和《醫(yī)門方》之開心丸，其藥方組成完全相同而配伍比例不同，主治的描述雖有相似之處，主要有調(diào)節(jié)情志，益智、防老抗衰等功效，其實(shí)卻各有側(cè)重?！肚Ы鹨健泛汀夺t(yī)門方》之開心散主治好忘；《備急千金要方》之定志小丸及《古今錄驗(yàn)》之定志丸為主治心氣不定，五臟不足，甚者憂愁悲傷

2、不樂，忽忽喜忘，朝愈暮劇，或暮愈朝發(fā)狂眩方；《醫(yī)心方》之開心散主治憂愁悲傷；《千金翼》之補(bǔ)心湯主治心氣不定，心痛驚悸。
　　本課題研究上述6個(gè)開心散類方即《千金要方》之開心散（開心散1)、《醫(yī)心方》之開心散（開心散2)、《千金翼》之補(bǔ)心湯、《古今錄驗(yàn)》之定志丸、《備急千金要方》之定志小丸和《醫(yī)門方》之開心丸對(duì)慢性不可預(yù)知性溫和應(yīng)激抑郁模型大鼠的行為學(xué)和抑郁癥相關(guān)指標(biāo)的影響，評(píng)價(jià)比較它們的抗抑郁作用及可能的作用機(jī)制，初步闡明其抗抑郁

3、作用與配伍之間的關(guān)系。
　　本研究首先建立慢性不可預(yù)知性溫和應(yīng)激（CUMS)抑郁模型，建立單胺類神經(jīng)遞質(zhì)（NE、DA、5-HT)和部分氨基酸（GLU、GABA)的HPLC檢測(cè)方法，并建立類方化學(xué)成分的UPLC-Q-TOF-MSE檢測(cè)方法。比較各類方對(duì)于模型動(dòng)物行為學(xué)（體重、曠場(chǎng)、糖水偏嗜度）的影響，評(píng)價(jià)類方的抗抑郁作用，放射免疫分析方法檢測(cè)各組動(dòng)物血清HPA軸神經(jīng)遞質(zhì)（CRH、ACTH、CORT)的含量，采用ELISA方法檢測(cè)各組

4、動(dòng)物血清7種細(xì)胞因子（IL-1、IL-2、IL-6、IL-10、IL-12、TNF-a、IFN-y)的含量，比較類方對(duì)各指標(biāo)的影響，以及比較各類方抗抑郁作用的差異及可能的機(jī)制；同時(shí)，本研究還采用UPLC-Q-TOF-MSE方法進(jìn)行了所有類方的指紋圖譜分析，并運(yùn)用Markerlynx軟件進(jìn)行多元統(tǒng)計(jì)處理，對(duì)處理得到的數(shù)據(jù)進(jìn)行主成分分析（PCA)和偏最小二乘法分析（OPLS-DA)，比較分析類方化學(xué)成分的差異與抗抑郁作用之間的相關(guān)性。

5、>　　CUMS抑郁模型造模前后的行為學(xué)實(shí)驗(yàn)表明，與正常組相比，模型組大鼠的體重、曠場(chǎng)得分和糖水偏嗜度均明顯降低；模型組大鼠大腦NE、DA、5-HT和GABA明顯降低，GLU和CRH、ACTH、CORT及血清細(xì)胞因子明顯升高。
　　造模成功并給予開心散類方灌胃2周后，與模型組相比，定志小丸組動(dòng)物和定志丸組動(dòng)物行為學(xué)得分明顯增加。開心散2組大鼠體重明顯增加，其他類方組動(dòng)物行為學(xué)改善作用不明顯。
　　與模型組動(dòng)物相比，定志小丸、定

6、志丸和開心散2組大鼠海馬和皮層中NE含量均明顯升高，其他組動(dòng)物大腦NE含量升高不明顯；除開心散1組動(dòng)物外，其他各組大鼠皮層中DA含量均明顯升高，各組大鼠海馬中DA含量有所升高，但均無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；定志小丸組動(dòng)物海馬和皮層的5-HT明顯升高，補(bǔ)心湯組大鼠海馬的5-HT含量明顯升高，定志丸組大鼠皮層的5-HT含量明顯升高，其他組大鼠大腦中5-HT含量升高不明顯。
　　與模型組動(dòng)物相比，定志小丸組大鼠海馬和皮層的GLU含量明顯降低，開

7、心散2組大鼠海馬中GLU含量明顯降低，定志丸組大鼠皮層中GLU含量明顯降低，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其他組大鼠大腦GLU降低均不明顯；除補(bǔ)心湯組和開心散2組外，其他各組大鼠海馬中GABA含量均明顯升高，除《千金翼》之補(bǔ)心湯組外，其他各組大鼠皮層中GABA含量均明顯升高,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　與模型組動(dòng)物相比，定志小丸組和定志丸組大鼠血清中CRH含量明顯降低，其他組動(dòng)物血清CRH降低不明顯；除開心丸組外，其他類方組大鼠血清ACTH含量均明顯

8、降低；定志小丸、定志丸和開心散2組大鼠血清中的CORT含量明顯降低，其他組動(dòng)物血清CORT含量改變不明顯。
　　與模型組動(dòng)物相比，所有類方組大鼠血清中IL-1、IL-12、IFN-y、TNF-a含量均明顯降低；除開心丸組外，其他組大鼠血清IL-2均未見明顯降低；除開心散2組外，其他組大鼠血清IL-6均明顯降低；除定志小丸組外，其他類方組大鼠血清IL-10均明顯降低。
　　化學(xué)成分分析結(jié)果表明，《備急千金要方》之定志小丸和《古

9、今錄驗(yàn)》之定志丸的化學(xué)成分相似，而《醫(yī)門方》之開心丸和《千金要方》之開心散的化學(xué)成分與其他類方的化學(xué)成分差異較大；采用偏最小二乘法分析（OPLS-DA)對(duì)差異性化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，并將《醫(yī)門方》之開心丸和《千金要方》之開心散分別與《備急千金要方》之定志小丸的化學(xué)成分進(jìn)行差異性比較，結(jié)果表明，《醫(yī)門方》之開心丸與《備急千金要方》之定志小丸化學(xué)成分差異較大的是人參中的6個(gè)成分和遠(yuǎn)志中的2個(gè)成分，《千金要方》之開心散與《備急千金要方》之定志小

10、丸化學(xué)成分差異較大的是人參中的6個(gè)成分。
　　總結(jié)上述研究結(jié)果，通過行為學(xué)評(píng)分的改變和抑郁癥發(fā)病機(jī)制相關(guān)指標(biāo)的檢測(cè)，提示我們《備急千金要方》之定志小丸的抗抑郁作用確切，能夠明顯改善模型大鼠的抑郁癥狀，升高模型大鼠中樞單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的含量，調(diào)節(jié)模型大鼠中樞興奮性和抑制性氨基酸的異常紊亂，抑制模型大鼠HPA軸的亢進(jìn)及降低血清中細(xì)胞因子的含量；《古今錄驗(yàn)》之定志丸也顯示了較好的抗抑郁作用，并且參與了抑郁癥發(fā)病機(jī)制的多個(gè)環(huán)節(jié)；其他類方的抗