結(jié)締組織生長因子(CTGF)對卵巢癌生物學(xué)行為的調(diào)控.pdf

1、目的：本研究探究CTGF在卵巢癌組織及細(xì)胞株中的表達(dá)，并采用RNA干擾技術(shù)下調(diào)卵巢癌細(xì)胞株中CTGF的基因，探討CTGF與卵巢癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。
　　方法：
　?、偻ㄟ^RT-PCR及免疫組化方法檢測人卵巢癌及對照組組織中CTGF的表達(dá)；
　?、谕ㄟ^RT-PCR及western blot檢測人卵巢癌細(xì)胞株BG-1、SKVO3、A2780中CTGF的表達(dá)，篩選出相對高表達(dá)CTGF的卵巢癌細(xì)胞株；
　?、劾弥|(zhì)體20

2、00轉(zhuǎn)染人CTGF基因特異性小分子RNA至人卵巢癌相對高表達(dá)CTGF的細(xì)胞株，在蛋白及mRNA表達(dá)水平檢測干擾效果，篩選出成功沉默CTGF表達(dá)的細(xì)胞；
　?、懿捎肕TT及Transwell實(shí)驗(yàn)方法分析轉(zhuǎn)染前后卵巢癌細(xì)胞株增殖及侵襲能力的變化。
　　結(jié)果：
　?、賀T-PCR及免疫組化檢測顯示，與卵巢良性腫瘤和正常卵巢組織相比較，CTGF在人卵巢癌中低表達(dá)，對臨床相關(guān)腫瘤特性的分析顯示CTGF與卵巢癌的病理類型、腹水癌細(xì)

3、胞陽性率、年齡及病理分級無相關(guān)性，而與病理分期、淋巴轉(zhuǎn)移相關(guān)。
　　②采用RT-PCR及western blot檢測得出，BG-1細(xì)胞株與SKVO3、A2780細(xì)胞株相比較，BG-1細(xì)胞株較高表達(dá)CTGF，成功篩選出為進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)的目的細(xì)胞株。
　?、蹖G-1細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染CTGF siRNA,實(shí)驗(yàn)組的CTGF蛋白及mRNA表達(dá)和對照組相比較，表達(dá)量明顯減少，為下一步實(shí)驗(yàn)選擇出成功沉默的細(xì)胞株。
　　④在Transw

4、ell及MTT實(shí)驗(yàn)中，成功轉(zhuǎn)染CTGF小分子干擾RNA的卵巢癌細(xì)胞組可增強(qiáng)卵巢癌細(xì)胞的增殖和侵襲能力。
　　結(jié)論：CTGF在卵巢癌組織中低表達(dá)，針對CTGF于卵巢癌臨床病理參數(shù)的分析顯示CTGF卵巢癌患者的病理分期、淋巴轉(zhuǎn)移相關(guān)，而與其他病理參數(shù)無相關(guān)性，通過采用siRNA靶向沉默卵巢癌BG-1細(xì)胞株中CTGF后，卵巢癌細(xì)胞的增殖及侵襲能力均增強(qiáng)。結(jié)果提示CTGF在誘導(dǎo)的BG-1細(xì)胞株增殖和侵襲過程中起著重要作用，可為卵巢癌的治療