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1、混合乳酸菌輔助降血脂及促進(jìn)機(jī)體消化吸收功能特性具有一定理論與實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。本研究以篩選獲得的四株具有輔助降血脂功能特性的乳酸菌為研究對(duì)象,對(duì)單一及混合乳酸菌發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化,并探討混合菌株的輔助降血脂功效及對(duì)大鼠營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收的影響。主要研究結(jié)果如下:
(1)單一及混合乳酸菌發(fā)酵條件優(yōu)化。通過單因素實(shí)驗(yàn)研究了培養(yǎng)基碳氮源及發(fā)酵條件(培養(yǎng)基起始pH、培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)時(shí)間和接種量)對(duì)單一及混合乳酸菌活菌數(shù)及膽固醇降解率的影響。結(jié)果
2、表明,單一及混合菌株在各碳源中均能生長(zhǎng),確定了各菌株最佳碳源及氮源,同時(shí)選出對(duì)菌株活菌數(shù)和膽固醇降解率影響較為顯著的因素,并針對(duì)各個(gè)因素對(duì)菌株進(jìn)行響應(yīng)面優(yōu)化分析,獲得單一及混合菌株最優(yōu)發(fā)酵條件。L.rhamnosus grx10最優(yōu)發(fā)酵條件為:乳糖21.3g/L,大豆蛋白胨11.4g/L,起始pH值6.5,培養(yǎng)時(shí)間25h,培養(yǎng)溫度36.2℃,接種量5.9%。L.casei g9最優(yōu)發(fā)酵條件為:乳糖20.1g/L,大豆蛋白胨9.6g/L,
3、起始pH值7.0,培養(yǎng)時(shí)間35h,培養(yǎng)溫度32.5℃,接種量4.0%。L.Fermentum f5最優(yōu)發(fā)酵條件為:蔗糖18.7g/L,大豆蛋白胨10.8g/L,起始pH值6.0,培養(yǎng)時(shí)間25h,培養(yǎng)溫度36.7℃,接種量7.1%。B.longum w10最優(yōu)發(fā)酵條件為:葡萄糖22.1 g/L,胰蛋白胨11.2g/L,起始pH5.5,培養(yǎng)時(shí)間45h,培養(yǎng)溫度39.6℃,接種量7.3%。混合菌株最優(yōu)發(fā)酵條件為:乳糖24.2g/L,胰蛋白胨8
4、.4g/L,起始pH值6.5,培養(yǎng)時(shí)間30h,培養(yǎng)溫度28.3℃,接種量5.2%。綜合單因素、響應(yīng)曲面及優(yōu)化前后菌株膽固醇降解率、膽鹽水解酶酶活和活菌數(shù)分析結(jié)果,混合菌株在其最優(yōu)發(fā)酵條件下培養(yǎng),使得該菌株膽固醇降解率較優(yōu)化前增加了35.06%,活菌數(shù)顯著增加,膽鹽水解酶酶活顯著提高,綜合評(píng)價(jià)優(yōu)于各單菌株。
(2)研究單一及混合乳酸菌對(duì)動(dòng)物體內(nèi)輔助降血脂功效性影響。通過飼喂高脂飼料建立高脂血癥大鼠模型,給予高脂模型大鼠單一及混合
5、乳酸菌發(fā)酵液灌胃四周,發(fā)現(xiàn)單一及混合乳酸菌均能顯著降低高血脂大鼠血清TC、TG、LDL-C、AI值及ApoB的含量(P<0.05),其中混合乳酸菌較單一菌株更能顯著降低大鼠血清TG含量(P<0.05);通過測(cè)定肝臟中TC、TG含量及糞便中TC、TG及TBA含量,發(fā)現(xiàn)肝臟TC、TG含量顯著降低(P<0.05),糞便TC、TG及TBA含量顯著增加(P<0.05),以此達(dá)到輔助降血脂功效;在抗氧化能力方面,混合乳酸菌能顯著降低高脂血癥大鼠血清
6、ALT、AST含量(P<0.05);體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證實(shí)混合乳酸菌有助于控制大鼠體重,降低大鼠肝臟指數(shù)及血脂水平,增強(qiáng)大鼠抗氧化能力,輔助降血脂功效得到實(shí)現(xiàn),效果較菌株grx10和f5更為顯著(P<0.05)。
(3)研究單一及混合乳酸菌對(duì)高脂模型大鼠營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收的影響。發(fā)現(xiàn)高脂飲食對(duì)大鼠粗蛋白、粗脂肪及粗纖維表觀消化率影響不大(P>0.05),單一及混合乳酸菌能顯著提高大鼠粗纖維、粗脂肪及總鈣表觀消化率(P<0.05),其中,混
7、合乳酸菌較單一菌株能顯著提高大鼠總鈣表觀消化率(P<0.05);單一及混合乳酸菌能顯著提高大鼠血清TP、GLB的含量,混合乳酸菌較單一菌株更具有優(yōu)勢(shì)(P<0.05),各灌胃組能顯著降低血清BUN含量,但對(duì)血清ALB和GLU無顯著影響(P>0.05);大鼠胰腺淀粉酶活性在單一及混合乳酸菌干預(yù)后顯著降低(P<0.05),但胰蛋白酶及胰腺脂肪酶均無顯著變化(P>0.05); f5及混合乳酸菌能有效提高大鼠灌胃28天腸道淀粉酶及脂肪酶活性(P<
8、0.05),混合乳酸菌效果較單一菌株更為顯著(P<0.05)。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證實(shí)混合乳酸菌有助于促進(jìn)大鼠粗纖維、粗脂肪及總鈣等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收,提高大鼠血清營(yíng)養(yǎng)指標(biāo),促進(jìn)蛋白質(zhì)的沉積,加強(qiáng)蛋白質(zhì)的合成代謝,改善大鼠腸道淀粉酶和脂肪酶活性。表明混合乳酸菌發(fā)酵有助于增強(qiáng)大鼠營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝與消化吸收作用。
(4)研究單一及混合乳酸菌對(duì)大鼠腸道代謝產(chǎn)物變化的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn),與正常組相比,模型組大鼠糞便代謝產(chǎn)物中醋酸、丁酸、琥珀酸、磷酸肌酸、
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