應(yīng)用內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激模型評(píng)估納米銀的體內(nèi)體外毒性.pdf

1、第一部分：
　　目的：探討納米銀（AgNPs）對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞（RAW264.7）毒性效應(yīng)的影響，為AgNPs生物安全性的研究提供依據(jù)。 方法：將不同濃度的AgNPs（0，6.25，12.5，25，50，60，80μg/mL）和RAW264.7共同培養(yǎng)，8或24 h后采用甲基噻唑基四唑比色法（MTT）法測(cè)定各組細(xì)胞的活力，選取2.5μg/mL和5μg/mL兩個(gè)無(wú)明顯細(xì)胞毒性的濃度進(jìn)行后續(xù)研究，檢測(cè)應(yīng)激相關(guān)基因和蛋白表達(dá)的變化；酶

2、聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)液中炎癥因子TNF-α和IL-6的表達(dá)。
　　結(jié)果：用2.5μg/mL和5μg/mL的AgNPs處理細(xì)胞：24 h后相差顯微鏡下可見(jiàn)納米顆粒進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，且5μg/mL組的細(xì)胞形態(tài)有明顯改變；8和24小時(shí)后ELISA結(jié)果顯示IL-6無(wú)明顯變化，在5μg/mL的24 h處理組TNF-α表達(dá)有顯著升高，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)的基因和蛋白在5μg/mL的24 h處理組表達(dá)明顯上調(diào)。
　　結(jié)論：RAW2

3、64.7細(xì)胞暴露于低劑量的納米銀后表現(xiàn)出明顯的應(yīng)激反應(yīng)，并且與暴露的劑量和作用的時(shí)間存在正相關(guān)性；AgNPs的能夠進(jìn)入RAW264.7細(xì)胞，可能是其產(chǎn)生毒性效應(yīng)的必要條件。低劑量的AgNPs會(huì)干擾細(xì)胞的正常生理功能，長(zhǎng)期暴露可能產(chǎn)生不可逆的損傷，應(yīng)引起高度關(guān)注。
　　第二部分：
　　目的：研究納米銀經(jīng)靜脈注射后的主要靶器官分布及應(yīng)激效應(yīng)，為評(píng)估AgNPs對(duì)人體健康和環(huán)境的毒性影響提供理論依據(jù)。
　　方法：Balb/c小

4、鼠經(jīng)尾靜脈注射不同劑量（0.2、2、5mg/kg）的AgNPs8h后，檢測(cè)AgNPs在體內(nèi)各器官的生物分布、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激、氧化應(yīng)激等，評(píng)估小鼠暴露AgNPs后早期毒性效應(yīng)。
　　結(jié)果：應(yīng)激相關(guān)標(biāo)志性的蛋白質(zhì)和基因呈劑量依賴性的顯著上調(diào)，其中在脾、肝、肺、腎中最為明顯，并且導(dǎo)致急性毒性反應(yīng)；表明小鼠暴露于AgNPs后，脾、肝、肺、腎是AgNPs毒性的主要靶器官；心臟和腦中也有AgNPs存在，但本研究并未檢測(cè)到毒性反應(yīng)。
　　結(jié)論