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1、氧化應(yīng)激和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激已經(jīng)被牽涉到心臟病領(lǐng)域,盡管二者之間的關(guān)系仍然不很明確。本實(shí)驗(yàn)采用野生型Friend virus B(FVB)小鼠和金屬硫蛋白(MT)轉(zhuǎn)基因小鼠來(lái)研究谷胱甘肽缺失引起的氧化應(yīng)激對(duì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和心肌收縮功能的影響。FVB和MT轉(zhuǎn)基因小鼠分別用GSH合成酶抑制劑丁硫堇(Buthioninesulfoximine,BSO)食用水溶液(30mmol/L)喂養(yǎng)兩周。分別通過(guò)對(duì)GSH/GSSG、活性氧自由基(reactive ox
2、ygen species,ROS)、caspase-3活性的檢測(cè)以及蛋白免疫印記、Langendorff心臟離體灌流(LVDP和±dP/dt指標(biāo))以及電鏡技術(shù)來(lái)對(duì)氧化應(yīng)激、細(xì)胞凋亡、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激、心肌功能和心室超微結(jié)構(gòu)進(jìn)行評(píng)定。結(jié)果發(fā)現(xiàn)BSO顯著降低了GSH/GSSG比率,增加了ROS的產(chǎn)生,從而鞏固了氧化應(yīng)激。心肌功能和心室超微結(jié)構(gòu)在BSO處理后也發(fā)生了顯著的變化,而這些損傷明顯被MT所減輕。BSO通過(guò)上調(diào)BiP、calregulin、
3、p-IRE1α和p-eIF2α蛋白的表達(dá)而觸發(fā)了內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激,但是并沒(méi)有影響IRE1α和eIF2α總蛋白的表達(dá)量。同時(shí)BSO引起了CHOP/GADD153、caspase-12、Bax蛋白表達(dá)量的上調(diào)并增加了caspase-3的活性,減少了Bcl-2和p-JNK蛋白的表達(dá),從而引起細(xì)胞凋亡,而MT明顯改善了細(xì)胞凋亡的程度。另外,抗氧化劑N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激抑制劑牛熊去氧膽酸(taurou
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