加減駐景方含藥血清對二氯化鈷誘導后ARPE-19細胞表達VEGF及HIF-1α的影響.pdf

1、目的：
　　1.探討加減駐景方含藥血清對二氯化鈷（CoCl2）誘導后人視網(wǎng)膜色素上皮細胞（ARPE-19）增殖的影響。
　　2.探討加減駐景方含藥血清對二氯化鈷（CoCl2）誘導后人視網(wǎng)膜色素上皮細胞（ARPE-19）中血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)及低氧誘導因子-1a(HIF-la)蛋白表達的影響，初步探討加減駐景方抑制脈絡(luò)膜新生血管形成的分子機制，為加減駐景方治療脈絡(luò)膜新生血管提供實驗依據(jù)。
　　方法：
　　1

2、.體外培養(yǎng)ARPE-19細胞，取對數(shù)生長良好的細胞用于實驗，分為正常組，缺氧模型組，缺氧后藥物干預組，并設(shè)立不同濃度及時間組。
　　2.CCK-8法檢測不同時間、不同濃度藥物（含藥血清、空白血清、康柏西普）各組對細胞毒性的影響。
　　3.建立二氯化鈷(CoCl2)缺氧細胞模型。
　　4.CCK-8法檢測CoCl2誘導后不同時間、不同濃度藥物（含藥血清、空白血清、康柏西普）作用下各組細胞增殖的影響。
　　5.酶聯(lián)免

3、疫吸附試驗（ELISA）觀察CoCl2誘導后不同時間、不同濃度藥物（含藥血清、空白血清、康柏西普）作用下各組細胞上清液中VEGF、HIF-la表達的影響。
　　6.免疫印跡法(Western Blot)觀察CoCl2誘導后不同時間、不同濃度藥物（含藥血清、空白血清、康柏西普）作用下各組細胞中VEGF、HIF-la蛋白表達的影響。
　　結(jié)果：
　　1、不同濃度加減駐景方含藥血清、空白血清和20μg/mL康柏西普組對ARP

4、E-19細胞無毒性反應(yīng)，與正常組比較無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；40μg/mL及以上康柏西普濃度對ARPE-19細胞產(chǎn)生毒性反應(yīng)，與正常組比較（P＜0.05）。
　　2、CoCl2組（100、200μmol/L）可促進細胞的增殖、400μmol/L的 CoCl2組細胞呈現(xiàn)抑制狀態(tài)，均與正常組比較，差別具有統(tǒng)計學意義（p＜0.05）。3、缺氧模型組與正常組比較，細胞的增殖、VEGF及HIF-1α的表達高于正常組，差別具有統(tǒng)計學意義

5、（p＜0.05）；缺氧后藥物干預組（除空白血清、5％加減駐景方、5μg/ml康柏西普組）與模型組比較，細胞的增殖、VEGF及HIF-1α的表達低于模型組，差別具有統(tǒng)計學意義（p＜0.05）。
　　結(jié)論：
　　1、缺氧損傷后可誘導ARPE-19細胞的增殖及VEGF、HIF-la蛋白的表達增加；
　　2、加減駐景方含藥血清對缺氧損傷后ARPE-19細胞的增殖及VEGF、HIF-la蛋白的表達有抑制作用；
　　3、加減