2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的 構(gòu)建牛乳鐵多肽(Lactoferricin B)的真核表達(dá)質(zhì)粒。pYES2/LactoferricinB，實(shí)現(xiàn)其在釀酒酵母S.cerevisiae中的表達(dá)，初步檢測(cè)其不同變異的體外抗菌活性。 方法 通過分別合成Lactoferdcin B基因兩條單鏈的部分序列，讓其互為模板、引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，得到Lactoferricin B與幾種變異的基因序列。將它們克隆到穿梭質(zhì)粒pYES2中，構(gòu)建重組質(zhì)粒pYE

2、S2/Lactoferricin B等，轉(zhuǎn)化到大腸桿菌Top10中，讓其大量增殖。提取目的質(zhì)粒經(jīng)純化后將轉(zhuǎn)化到S.cerevisiae中，通過營(yíng)養(yǎng)缺陷型篩選獲得重組酵母菌并通過半乳糖誘導(dǎo)使其表達(dá)目的蛋白。經(jīng)離子交換柱純化收集目的蛋白后，通過體外抑菌實(shí)驗(yàn)比較其抗菌活性。 結(jié)果 提取含該片段的重組質(zhì)粒經(jīng)PCR擴(kuò)增檢驗(yàn)、DNA測(cè)序表明，所得幾種質(zhì)粒分別包含了Lactoferdcin B與幾種變異的基因序列，即成功構(gòu)建了目的

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