久瀉靈顆粒對脾腎陽虛型潰瘍性結(jié)腸炎模型大鼠MyD88、IRAK1及炎性細胞因子表達的影響.pdf

1、目的：觀察久瀉靈顆粒在脾腎陽虛型UC模型大鼠的治療過程中，對結(jié)腸組織的病理形態(tài)變化、IL-2、IL-4、IL-10炎癥因子及TLR信號通路相關(guān)基因蛋白質(zhì)MyD88、IRAK1表達的影響，解釋服用久瀉靈顆粒治療UC的治療效果、作用機理及相關(guān)治療靶點。
　　方法：SPF級Wistar大鼠90只隨機分空白、模型組，采用大黃水煎液灌胃+肌注氫化可的松+TNBS/乙醇灌腸法建立動物模型。造模成功后，將模型組隨機分為脾腎陽虛型UC模型組、久瀉

2、靈顆粒高、中、低劑量組和陽性對照組。取材后對結(jié)腸組織進行肉眼形態(tài)觀察及HE染色后鏡下觀察進行評分，ELISA法檢測大鼠血清IL-2、IL-4、IL-10的含量、RT-qPCR法檢測大鼠結(jié)腸組織中MyD88、IRAK1基因的表達、免疫組化法及免疫印跡法檢測大鼠結(jié)腸組織中MyD88、IRAK1蛋白質(zhì)表達。
　　結(jié)果：
　　1.ELISA法檢測大鼠血清IL-2、IL-4、IL-10的含量：相比空白組，模型組大鼠血清中IL-2、IL

3、-4、IL-10的含量降低（P＜0.01），差異具有統(tǒng)計學(xué)意義；相比模型組，各治療組大鼠的血清中IL-2、IL-4、IL-10的含量升高（P＜0.05），差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，其中最為顯著的是久瀉靈顆粒高劑量組（P＜0.01）。
　　2.RT-qPCR法檢測大鼠結(jié)腸組織中MyD88、IRAK1 mRNA的相對表達量：相比模型組，空白組大鼠結(jié)腸中MyD88、IRAK1 mRNA的相對表達量降低明顯，差異顯著（P＜0.01）；相比模型組

4、，各治療組大鼠的結(jié)腸組織中MyD88、IRAK1 mRNA的相對表達量也不同程度降低（P＜0.01），且高劑量組的降低最著；相比久瀉靈顆粒高劑量組，久瀉靈顆粒中劑量、低劑量、SASP組組間差異明顯，具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　　3.免疫組化法檢測大鼠結(jié)腸組織中MyD88、IRAK1蛋白質(zhì)表達：空白組鏡下觀察大鼠結(jié)腸中MyD88、IRAK1表達為陰性。相比空白組，模型組大鼠的結(jié)腸中MyD88、IRAK1陽性表達明顯，強于空白

5、組，平均光密度值升高明顯（P＜0.01），差異顯著；相比模型組，各治療組大鼠的結(jié)腸中MyD88、IRAK1呈弱陽性表達或中等強度表達，仍強于空白組，平均光密度值下降（P＜0.01），下降最為明顯的是高劑量組，差異顯著，勝于SASP組；相比久瀉靈顆粒高劑量組，久瀉靈顆粒中劑量、低劑量、SASP組組間差異明顯，具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　　4.免疫印跡法檢測大鼠結(jié)腸組織中MyD88、IRAK1蛋白質(zhì)表達：相比空白組，模型組大鼠

6、的結(jié)腸組織中MyD88、IRAK1蛋白質(zhì)表達升高，差異具有顯著性（P＜0.01）；相比模型組，各治療組大鼠的結(jié)腸組織中MyD88、IRAK1蛋白質(zhì)表達下降明顯（P＜0.01），其中高劑量組尤其顯著；相比久瀉靈顆粒高劑量組，久瀉靈顆粒中劑量、低劑量、SASP組組間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.久瀉靈顆粒的IL-2、IL-4、IL-10的含量有上調(diào)作用，抑炎因子可抑制炎細胞發(fā)展浸潤、減輕黏膜炎癥、使組