久瀉靈顆粒劑治療潰瘍性結(jié)腸炎的實驗及臨床研究.pdf

1、目的：
　　 本研究觀察了久瀉靈顆粒劑（Jiuxieling granules，JXLG）對免疫復(fù)合物聯(lián)合乙酸局部灌注的方法建立的大鼠潰瘍性結(jié)腸炎（Ulcerative coliris，UC）模型的結(jié)腸組織粘膜脂質(zhì)過氧化水平、血清炎性細(xì)胞因子水平、結(jié)腸組織病理改變、結(jié)腸組織NF-κB及ICAM-1表達(dá)的影響；另外，觀察了JXLG對32例潰瘍性結(jié)腸炎患者的臨床療效及其治療前后的對腸粘膜IgA，IgG， IgM和補(bǔ)體C3的影響，以探

2、討JXLG對潰瘍性結(jié)腸炎的防治作用及其藥理機(jī)制。
　　 方法：
　　 1.采用異種異體結(jié)腸黏膜組織致敏法和乙酸局部灌腸相結(jié)合的方法制造動物模型。將wistar大鼠隨機(jī)分為正常對照組，模型對照組，陽性對照組（Salicylazosul fapyridine，SASP組），JXLG大、中、低劑量組。連續(xù)給藥14天，末次給藥后24h，大鼠股動脈取血分離血清，采用放射免疫法測定大鼠血清及結(jié)腸組織勻漿細(xì)胞因子IL-4、TNF-α含

3、量及ELISA法測定大鼠血清細(xì)胞因子IFN-γ含量。處死大鼠后制備結(jié)腸組織勻漿，生化法檢測結(jié)腸組織中GSH-Px、SOD、MDA、NO、TNOS和iNOS的水平；處死大鼠后同時制備結(jié)腸組織標(biāo)本，病理切片HE染色后進(jìn)行病理組織學(xué)評分；免疫組化切片觀察結(jié)腸組織NF-κB及ICAM一1的表達(dá)。2.將64例患者隨機(jī)分為治療組和對照組，治療組采用純中藥JXLG口服和灌腸治療，對照組（SASP組）口服西藥柳氮磺胺吡啶治療。兩組均以2w為1個療程，連

4、續(xù)服用3個療程后觀察兩組治療前后治療組總有效率，腸粘膜病變改善情況及IgA，IgG，IgM，補(bǔ)體C3變化情況。
　　 結(jié)果：
　　 1.JXLG可顯著改善腸黏膜炎癥，降低病理組織學(xué)評分。模型組黏膜層見不同程度充血、水腫、糜爛及出血，淺小潰瘍形成，潰瘍面有滲出性壞死層，潰瘍的周圍腺體擴(kuò)張，腺上皮細(xì)胞輕度增生，粘膜下固有層局部充血、水腫，腸壁各層充滿浸潤的炎性細(xì)胞。以中性粒細(xì)胞為主。模型組病理組織學(xué)評分顯著高于正常對照組（P

5、<0.001）JXLG小、中、大劑量組及陽性對照組潰瘍較淺表，潰瘍旁上皮修復(fù)明顯，腺體增生活躍，腸黏膜充血、水腫、糜爛顯著改善。還可見較少的炎性細(xì)胞浸潤。JXLG小、中、大劑量組及陽性對照組病理組織學(xué)評分明顯降低（P<0.05，P<0.001）。
　　 2.JXLG不同劑量可使NF-κB及ICAM-1表達(dá)減弱。正常對照組僅見微弱的NF-κB表達(dá)，模型組NF-κ B表達(dá)水平明顯增高（P<0.001），陽性對照組和JXLG大、中劑量

6、組可使結(jié)腸NF-κ B表達(dá)減弱（P<0.01，P<0.05）。正常對照組腸組織僅見極少量的ICAM-1表達(dá)，模型組有明顯的ICAM-1陽性表達(dá)（P<0.01），其陽性細(xì)胞積分光密度明顯高于正常對照組和藥物組（P<0.01）。
　　 3.JXLG可明顯降低結(jié)腸組織中NO、TNOS、iNOS和MDA的活性或水平，升高GSH-Px、SOD的活性。與正常對照組比較，模型組大鼠結(jié)腸組織MDA含量升高（P<0.01），SOD、GSH-Px計

7、數(shù)水平顯著降低（P<0.01，P<0.05）；模型組與正常對照組相比NO、TNOS及iNOS含量升高（P<0.001）；說明急慢性病變復(fù)合模型造模成功。與模型組比較，JXLG大、中劑組SOD、GSH-Px計數(shù)水平顯著升高（P<0.01，P<0.05），組織MDA含量顯著下降（P<0.01）。JXLG大、中劑量NO、TNOS和iNOS水平均有下降（P<0.001，P<0.05），尤以JXLG大劑組作用明顯。
　　 4.UC模型大鼠

8、血清IFN-γ含量明顯升高（P<0.01），JXLG大、中、小劑量組血清IFN-γ含量低于模型大鼠（P<0.01 or P<0.05）；UC模型大鼠血清IL-4含量低于正常對照組（P<0.01），JXLG大、中劑量組血清IL-4含量高于模型大鼠（P<0.01 orP<0.05）；UC模型大鼠血清TNF-α含量明顯升高（P<0.01），JXLG大、中劑量組血清TNF-α含量低于模型大鼠（P<0.01 or P<0.05）。UC模型大鼠結(jié)腸

9、粘膜勻漿IL-4含量低于正常對照組（P<0.01），JXLG大、中、小劑量組大鼠結(jié)腸粘膜勻漿IL-4含量高于模型大鼠（P<0.01 or P<0.05）；UC模型大鼠結(jié)腸粘膜勻漿TNF-α含量高于正常對照組（P<0.05），JXLG大、中、小劑量組大鼠結(jié)腸粘膜勻漿TNF-α含量低于模型大鼠（P<0.01 orP<0.05）。
　　 5.JXLG能夠明顯改善臨床癥狀和病灶，提高機(jī)體的免疫力和抵抗力，能夠降低IgA，IgG，IgM，

10、補(bǔ)體C3值。治療組總有效率占90.6％，對照組占78.1％。
　　 結(jié)論：
　　 1.JXLG對潰瘍性結(jié)腸炎模型大鼠有顯著的干預(yù)作用，其機(jī)制可能與抗氧自由基損傷，抑制NO、TNOS和iNOS生成，及增強(qiáng)抗氧化酶活性有關(guān)。JXLG通過抑制NF-κB激活和ICAM-1表達(dá)，阻斷炎癥的放大效應(yīng)而達(dá)到減輕結(jié)腸粘膜炎癥，是治療UC的一種有效中藥顆粒劑。JXLG可升高IL-4水平而降低IFN-γ和TNF-α水平，對潰瘍性結(jié)腸炎模型大