環(huán)棘鞭蛇尾(Ophiomastix annulosa)皂苷的制備及其生物活性研究.pdf

1、本論文以環(huán)棘鞭蛇尾(Ophiomastix annulosa)作為實驗材料,全面分析了煙臺崆峒島海域的環(huán)棘鞭蛇尾(整體)的營養(yǎng)成分,研究了環(huán)棘鞭蛇尾皂苷的最佳提取工藝,測定了環(huán)棘鞭蛇尾皂苷的理化性質,對環(huán)棘鞭蛇尾皂苷進行了分離純化,并且對其抗氧化活性、抑菌活性、溶血活性和抗腫瘤活性進行了研究。
　　營養(yǎng)成分分析結果:水分含量為2.55％,灰分含量為45%,蛋白質含量為19.04%,總糖含量為1.72%,粗脂肪含量為2.20%,其中

2、多不飽和脂肪酸含量豐富,二十碳五烯酸( EPA)和花生四烯酸(AA)的含量較高,占總脂肪酸的17.87%。人體必需氨基酸占氨基酸總量的25.39%,無機元素中Ca含量最高。因此,環(huán)棘鞭蛇尾(整體)營養(yǎng)成分豐富,具有良好的開發(fā)利用價值。
　　采用單因素實驗結合正交試驗對環(huán)棘鞭蛇尾皂苷的提取工藝進行研究,結果表明,提取環(huán)棘鞭蛇尾皂苷的最佳條件為:85%的乙醇溶液浸提,提取溫度為55℃,提取料液比為1:20,重復提取3次,并且驗證實驗的

3、結果與實驗設計基本一致。
　　采用溶劑浸提法得到環(huán)棘鞭蛇尾粗皂苷,然后依次用水、20%乙醇、40%乙醇、60%乙醇、80%乙醇經(jīng)過大孔樹脂 AB-8分離純化除去多糖和無機鹽,收集各洗脫部分。80%的乙醇洗脫組分進行硅膠柱層析,經(jīng) TLC( thin layer chromatography)點板得到單一組分。
　　通過物理化學方法對環(huán)棘鞭蛇尾皂苷進行鑒定,表明環(huán)棘鞭蛇尾皂苷是甾體皂苷;與標準皂苷進行比較,在200-800 n

4、m波長范圍內(nèi)進行紫外掃描,得到在216 nm處有最大吸收峰,在400-4000 cm-1范圍內(nèi)進行紅外掃描,結果說明環(huán)棘鞭蛇尾皂苷是25R異螺甾烷醇型。
　　溶血活性實驗表明,環(huán)棘鞭蛇尾皂苷具有溶血活性。這種活性在消除血栓、預防心血管疾病等方面有著積極的意義,具有研究價值和開發(fā)前景。
　　采用濾紙片法測定結果表明環(huán)棘鞭蛇尾皂苷對供試菌均有一定的抑制作用,其中大腸桿菌(Escherichia coli)表現(xiàn)為最敏感,金黃色葡萄

5、球菌(Staphyloccocus aureus Rosenbach)表現(xiàn)為中度敏感,而啤酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae Hansen)、黃曲霉(Aspergillus flavus)表現(xiàn)為低度敏感。環(huán)棘鞭蛇尾皂苷對四種供試菌的最低抑菌濃度(MIC)依次為:0.5mg/mL、1.0 mg/mL、4.0 mg/mL和2.0mg/mL。
　　采用MTT法測定環(huán)棘鞭蛇尾皂苷的抗腫瘤活性。結果表明,環(huán)棘鞭蛇尾皂

6、苷對腫瘤細胞HCT-116、MCF-7、LnCAP、HCT-15具有顯著的抑制作用,對RM-1、Acan有抑制作用,但是效果不顯著。實驗結果表明,HCT-116、MCF-7、LnCAP、HCT-15四種腫瘤細胞對皂苷樣品表現(xiàn)出了很強的敏感性。由此說明,篩選出環(huán)棘鞭蛇尾皂苷對四種腫瘤細胞HCT-116、MCF-7、LnCAP、HCT-15具有抗腫瘤作用,為動物皂苷的抗腫瘤研究提供了理論基礎。
　　環(huán)棘鞭蛇尾皂苷的抗氧化活性實驗主要包