α-硫辛酸對鎘致大鼠肝腎損傷的保護作用.pdf

1、為探討鎘和α-硫辛酸(α-LA)對大鼠肝腎功能的影響以及此過程中細胞縫隙通訊功能(GJIC)的變化。本研究采用體內(nèi)建模的方法，100 g雌性SD大鼠30只預(yù)飼1周后，隨機分為3組，每組10只，分別為對照組（Control）、鎘組(Cd)、鎘與α-硫辛酸共同處理組(Cd+α-LA)。對照組實驗大鼠自由飲用超純水(DDW)，鎘組大鼠50 mg/L的醋酸鎘自由飲水，鎘與α-硫辛酸共同處理組在醋酸鎘自由飲水的同時進行每公斤體重50mg（50 m

2、g/kg.bw）α-硫辛酸灌胃。①試驗12周內(nèi)，每天定時測定各組大鼠的采食量和體重，在試驗第4周、8周對各組大鼠進行眼眶靜脈叢采血，進行血常規(guī)檢測，并測定血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、血清堿性磷酸酶(ALP)活性及總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、尿酸(UA)的含量。②試驗結(jié)束后進行血常規(guī)以及血清中生化相關(guān)指標(biāo)檢測的同時，測定各組大鼠血清、肝臟、腎臟中超氧化物歧化酶(SOD)，谷胱甘

3、肽過氧化物酶(GSH-Px)、過氧化氫酶(CAT)的活性以及丙二醛(MDA)、鎘的含量。③采用透射電鏡以及光學(xué)顯微鏡觀察各組大鼠的肝臟、腎皮質(zhì)的病理、超微結(jié)構(gòu)變化。④采用切開熒光染料標(biāo)記傳輸示蹤法(IL/DT)對各組肝臟細胞間縫隙連接通訊功能進行檢測。利用Westernblot檢測各組大鼠肝臟、腎臟中Cx43、p-Cx43、Cx32蛋白表達變化。⑤采用熒光定量PCR法檢測試驗結(jié)束后各組大鼠肝臟、腎臟中Cx32、Cx26、Cx43mRNA

4、表達量的變化。
　　結(jié)果表明:①試驗4周后，各組大鼠血液紅細胞數(shù)、血紅蛋白含量以及肝腎功能相關(guān)指標(biāo)（ALB、AST、ALT、BUN、UA、TP、ALP）變化不明顯。試驗8周、12周鎘組大鼠血清ALB、AST、ALT、BUN、UA含量顯著或極顯著高于對照組(p＜0.05或p＜0.01)，而TP、ALP含量顯著或極顯著低于對照組(p＜0.05或p＜0.01),紅細胞數(shù)、血紅蛋白含量顯著或極顯著低于對照組（p＜0.05或p＜0.01），

5、而鎘與α-硫辛酸共同處理組在不同時間與對照組相比均差異不明顯(p＞0.05)。②試驗12周后，與對照組相比，鎘組大鼠血清、肝臟、腎臟中SOD、CAT、GSH-Px活性顯著或極顯著的降低(p＜0.05或p＜0.01)，MDA含量呈顯著或極顯著升高(p＜0.05或p＜0.01);而鎘與α-硫辛酸共同處理組與對照組相比差異顯著或不顯著（p＜0.05或p＞0.05）。③鎘組肝腎病理變化表現(xiàn)為肝臟中央靜脈周圍脂肪變性、匯管區(qū)膽管上皮增生，腎皮質(zhì)腎

6、小球萎縮。鎘與α-硫辛酸共同處理組肝細胞輕度的脂肪變性，腎小球上皮細胞顆粒變性。電鏡結(jié)果顯示:鎘組大鼠腎皮質(zhì)、肝臟細胞器損傷明顯，表現(xiàn)為細胞核濃縮，核內(nèi)染色質(zhì)分布不均勻，線粒體脊完全消失、模糊。而鎘與α-硫辛酸共同處理組大鼠肝腎超微結(jié)構(gòu)變化相對較輕。④IL/DT結(jié)果顯示，鎘組、鎘與α-硫辛酸共同處理組肝細胞兩側(cè)熒光黃(LY)擴散距離極顯著低于對照組(p＜0.01)，而鎘與α-硫辛酸共同處理組兩側(cè)LY擴散距離極顯著高于鎘組(p＜0.01)

7、;與對照組相比，鎘組、鎘與α-硫辛酸共同處理組肝腎中連接蛋白43(Cx43)、磷酸化連接蛋白43(p-Cx43)、連接蛋白32(Cx32)蛋白表達量呈顯著或極顯著的降低（p＜0.05或p＜0.01），而鎘與α-硫辛酸共同處理組的連接蛋白表達水平顯著或極顯著的高于鎘組（p＜0.05或p＜0.01）。⑤鎘組、鎘與α-硫辛酸共同處理組大鼠肝腎中Cx43、Cx32、Cx26 mRNA轉(zhuǎn)錄基因表達與對照組相比均顯著或極顯著的降低（p＜0.05或p

8、＜0.01），鎘與α-硫辛酸共同處理組與鎘組相比呈顯著或極顯著升高（p＜0.05或p＜0.01）。
　　結(jié)論:①α-硫辛酸能夠保護鎘對大鼠肝腎功能以及血液常規(guī)指標(biāo)的毒性變化，試驗期越長α-硫辛酸保護作用越明顯;②鎘可以引起大鼠血清以及肝腎中抗氧化物酶活性的降低以及脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物的升高，α-硫辛酸能提高機體的抗氧化功能而保護鎘的毒性;③鎘引起大鼠多種組織發(fā)生明顯的病理學(xué)變化，肝臟和腎臟較嚴重，尤其是細胞核、線粒體損傷嚴重，α-硫辛酸