枸杞葉總黃酮對小鼠腦缺血再灌注的保護作用.pdf

1、目的：通過建立小鼠腦缺血再灌注模型，探究枸杞葉總黃酮對小鼠腦缺血再灌注的保護作用，并從其抗氧化活性和對 ATP酶活性影響方面探討可能機制，以期為枸杞葉總黃酮作為保護腦缺血藥物的應(yīng)用提供藥理學(xué)的參考。
　　方法：出生2月齡的60只健康雄性昆明小鼠，隨機分為6個小組（每組10只），假手術(shù)組、模型組、枸杞葉總黃酮低劑量組（30mg/kg）、枸杞葉總黃酮中劑量組（100mg/kg）、枸杞葉總黃酮高劑量組（300mg/kg）和尼莫地平組（2

2、0mg/kg）。枸杞葉總黃酮組和尼莫地平組小鼠灌胃給藥（0.1ml/10g），假手術(shù)組、模型組小鼠給予雙蒸水（0.1ml/10g），每天一次，連續(xù)給藥十四天后，小鼠用10％的水合氯醛腹腔注射麻醉后進行雙側(cè)頸總動脈結(jié)扎，缺血15分鐘后復(fù)灌10分鐘，再缺血15分鐘復(fù)灌24小時后處死，取腦稱重，計算腦指數(shù)，然后在110℃烤至恒重，計算腦含水量。通過試劑盒檢測小鼠腦組織中SOD活性、MDA含量及Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶的活性。

3、通過HE染色觀察大腦皮質(zhì)及海馬CA1區(qū)的神經(jīng)元形態(tài)學(xué)變化。
　　結(jié)果：
　　1.枸杞葉總黃酮對小鼠缺血再灌注后腦指數(shù)和腦含水量的影響：在腦缺血再灌注模型中，高劑量的枸杞葉總黃酮能夠有效降低小鼠的腦指數(shù)和腦含水量（與模型組相比，P＜0.05，n=10）。
　　2.枸杞葉總黃酮對小鼠缺血再灌注后大腦脂質(zhì)過氧化程度的影響：假手術(shù)組SOD活力和MDA含量水平分別為110±3.9Uml和6.1±0.4nmol/ml。模型組腦組織

4、的SOD活力降低至99.7±4.1Uml（與假手術(shù)組相比P＜0.05，n=10），MDA含量水平升高至9.9±0.9 nmol/ml（與假手術(shù)組相比P＜0.05，n=10）。高劑量的枸杞葉總黃酮預(yù)處理后能顯著減輕大腦的脂質(zhì)過氧化程度，小鼠腦組織內(nèi)的SOD活性明顯提高（與模型組相比，P＜0.05，n=10），MDA的含量水平降低（與模型組相比，P＜0.05，n=10）。
　　3.枸杞葉總黃酮對小鼠缺血再灌注后腦組織中Na+-K+-A

5、TP酶、Ca2+-ATP酶的影響：假手術(shù)組Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶水平分別為1.77±0.50μmol/mgprot/h和1.85±0.47μmol/mgprot/h。模型組腦組織的Na+-K+-ATP酶活力降低至1.07±0.30μmol/mgprot/h（與假手術(shù)組相比P＜0.05，n=10），Ca2+-ATP酶活力降低至1.16±0.27μmol/mgprot/h（與假手術(shù)組相比P＜0.05，n=10）。高劑量的

6、枸杞葉總黃酮預(yù)處理后能顯著抑制Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性下降（與模型組相比，P＜0.05，n=10）。
　　4.枸杞葉總黃酮對缺血再灌注小鼠大腦皮質(zhì)以及海馬神經(jīng)元形態(tài)學(xué)的影響：小鼠雙側(cè)頸總動脈結(jié)扎（2VO）缺血15分鐘再灌注24小時后，取小鼠腦組織進行HE染色發(fā)現(xiàn)模型組的小鼠大腦皮質(zhì)及海馬 CA1區(qū)神經(jīng)元有明顯的損害，可觀察到細(xì)胞核濃縮、核消失、神經(jīng)元缺失等現(xiàn)象，正常的神經(jīng)元數(shù)目減少。枸杞葉總黃酮預(yù)處理后則明顯