知母總皂苷對(duì)腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及機(jī)制研究.pdf

1、第一軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文知母總皂苷對(duì)腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及機(jī)制研究姓名：吳非申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師：劉振華20060510中文摘要進(jìn)行觀察；組織形態(tài)學(xué)的變化采用光學(xué)顯微鏡觀察法；腦梗塞面積的觀察采用氯化三苯基四氮唑(TTC)染色劑對(duì)腦組織進(jìn)行染色觀察。體外血小板聚集試驗(yàn)中，經(jīng)新西蘭兔心臟采血，制各富血小板血漿(PRP)及貧血小板血漿(PPP)，以ADP為誘導(dǎo)劑置于血液凝聚儀中進(jìn)行血小板聚集抑制率的測(cè)定。體外培養(yǎng)人

2、臍靜脈微血管內(nèi)皮細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中，取5代以內(nèi)生長(zhǎng)致密的內(nèi)皮細(xì)胞，01％胰蛋白酶消化，用含10％小牛血清的DMEM培養(yǎng)基調(diào)整細(xì)胞數(shù)至15x105／ml，按照每孔1009l接種于96孔的培養(yǎng)板中，置370C，5％C02孵箱中孵育48h后，再換以無血清的DMEM培養(yǎng)基，靜息12h后，滴加不同濃度的SAaB，以ELISA法測(cè)定細(xì)胞間粘附分子(ICAM一1)的表達(dá)。結(jié)果通過CBCA、MCAO法成功制備成年大鼠的I／R模型，不僅使大鼠表現(xiàn)明顯行為學(xué)的改變

3、，還引起受損腦組織水腫，組織形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)的明顯改變和具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的能量代謝障礙、自由基生成增加及脂質(zhì)過氧化反應(yīng)活躍等一系列的改變。因此，這兩種I／R模型可以應(yīng)用于SAaB的藥效學(xué)研究。I／R后24h時(shí)，模型組大鼠表現(xiàn)出明顯神經(jīng)功能障礙，神經(jīng)功能評(píng)分顯著高于生理對(duì)照組，同時(shí)模型組腦含水量亦明顯增加(與生理對(duì)照組比較P00I)，表明I／R后出現(xiàn)缺性神經(jīng)功能損傷并有腦水腫的發(fā)生。SAaB各劑量組大鼠神經(jīng)功能障礙明顯輕于模型組，并且腦水腫亦

4、有明顯減輕，神經(jīng)功能評(píng)分及腦含水量測(cè)定與模型組比較均有顯著差異(P005)。光學(xué)顯微鏡的結(jié)果表明SAaB能有效保護(hù)I／R后腦組織超微形態(tài)結(jié)構(gòu)的正常性，SAaB各個(gè)劑量組神經(jīng)元改變較輕，缺血水腫灶較小，基本結(jié)構(gòu)及細(xì)胞大致正常。在MCAO法制造I／R模型的TTC染色腦組織切片中，白色區(qū)域?yàn)槟X缺血側(cè)梗塞區(qū)，正常腦組織被染成玫瑰紅色。對(duì)腦組織照相后通過圖像分析計(jì)算缺血梗死灶的體積比，分析SAaB各個(gè)劑量組的腦梗塞程度較模型組明顯減輕，統(tǒng)計(jì)分析存