毛葡萄葉水提物對大鼠腦缺血再灌注的保護作用.pdf

1、目的：通過建立大鼠大腦中動脈閉塞(middle cerebral artery occlusion，MCAO)局灶性腦缺血再灌注模型，探討毛葡萄葉水提物對大鼠腦缺血再灌注的保護作用及其可能作用機制，為進一步研發(fā)毛葡萄的藥物作用提供實驗依據。 方法：(1)實驗分組及給藥：SD大鼠60只，♀♂各半，體重(250±20)g隨機分為六組即：正常組，對照組，陽性藥物尼莫地平組，毛葡萄大劑量組，毛葡萄中劑量組，毛葡萄小劑量組，每組大鼠10只

2、。分組后第二天各組大鼠灌胃給藥，毛葡萄大劑量組劑量(4g·kg-1·d-1)；毛葡萄中劑量組劑量(2g·kg-1·d-1)；毛葡萄小劑量組劑量(1g·kg-1·d-1)；尼莫地平組劑量(5mg·kg-1·d-1)，對照組和正常組大鼠灌等量生理鹽水；各組每日灌胃給藥1次。連續(xù)灌胃7天。 (2)大鼠腦缺血再灌注模型的制備：參照longa線栓法[1]建立大鼠大腦中動脈閉塞(middle cerebral artery occlusio

3、n，MCAO)局灶性腦缺血再灌注模型。除正常組之外，各組于末次給藥后30min以用4％水合氯醛(1ml/100g)麻醉動物，手術分離并暴露右側頸總動脈及頸內外動脈，結扎右側頸總動脈近心端及頸外動脈，在頸總動脈近分叉處剪一小口，插入頭端光滑尼龍線(直徑0.23mm，18mm處作標記)，插人長度約18±0.5mm，結扎并固定線栓，缺血2h后拔掉線栓再灌注22h。再灌注22h后各組首先進行神經功能評分，然后麻醉大鼠腹主動脈取血4ml，取離心血

4、漿分別用LDH、MDA、NO檢測試劑盒檢測血漿LDH、MDA、NO含量變化。 將取出的腦從額極至枕葉作等距切成A,B,C,D,E五個冠狀腦片，每片厚度約為1.8mm，置于4％TTC液中37℃孵育染色30 min。染色后用4％多聚甲醛固定24h，用數碼相機拍照后用AutoCAD軟件進行統(tǒng)計腦缺血面積；用免疫細胞化學法檢測腦bcl-2、caspase-3的表達。 結論： 1.毛葡萄葉水提物對腦缺血再灌注引起的腦損傷有