熱激誘導(dǎo)表達Hd3a基因的水稻轉(zhuǎn)化研究及Hd3a信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機理初探.pdf

1、Hd3a(Heading date3a)基因是水稻開花調(diào)控途徑的信息整合基因(integrator)，負責(zé)將來自各種途徑的開花信號匯總起來，繼而誘導(dǎo)下游的花器官決定基因(floral organ identity genes)表達，從而誘導(dǎo)開花。研究表明，短日照誘導(dǎo)Hd3a在葉片中表達，然后其表達產(chǎn)物由葉片轉(zhuǎn)運至莖尖，在那里作用于下游基因，故此產(chǎn)物被認為是水稻進行長距離轉(zhuǎn)運的開花信號物質(zhì)。但對于該信號物質(zhì)是Hd3a mRNA還是Hd3a

2、蛋白，還存在一定的爭議。本課題借鑒擬南芥中同源基因FT(Flowering locus T)的研究成果設(shè)計了一系列實驗，用以考察Hd3a的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和作用機理。 本研究首先克隆了Hd3a基因，并構(gòu)建了熱激誘導(dǎo)Hd3a表達的載體pH2GW7-pHSP-Hd3a。通過農(nóng)桿菌(Agrobacterium tumifaciens)介導(dǎo)的方法將該表達載體轉(zhuǎn)化野生型水稻日本晴(Nipponbare)，獲得了轉(zhuǎn)基因植株。經(jīng)篩選得到了轉(zhuǎn)基因高水