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1、該研究應(yīng)用人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞ECV304細(xì)胞模型,采用FC,ELISA,RT-PCR,免疫組化,原位雜交,Western Blot印跡,Realtime RT-PCR等技術(shù)和方法,從細(xì)胞和分子水平研究Ox-LDL、LPC對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞(EC)VEGF蛋白和VEGF mRNA表達(dá)的影響及可能的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑,進(jìn)一步了解VEGF和Ox-LDL在內(nèi)皮細(xì)胞損傷中相互作用關(guān)系,從而深入了解它們?cè)赟A發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制.同時(shí)發(fā)現(xiàn)一些抑制VEGF表達(dá)的中藥
2、有效成分,為它在防治AS方面的應(yīng)用提供理論依據(jù).結(jié)果發(fā)現(xiàn),Ox-LDL、LPC可以顯著增加內(nèi)皮細(xì)胞VEGF蛋白和VEGF mRNA的表達(dá);藥物普羅布考(Pro)和中藥有效成分歐芹素乙(IMP)、銀杏葉提取物(GbE)、丹酚酸B(Lsab)和何首烏提取物二苯乙烯苷(ST I)可以抑制Ox-LDL、LPC的作用.提示在AS發(fā)展過程中Ox-LDL與VEGF可能共同發(fā)揮作用,尤其是在AS發(fā)展過程中Ox-LDL與VEGF可能共同發(fā)揮作用,尤其是在
3、AS發(fā)生的早期;藥物普羅布考和中藥有效成分IMP、GbE、Lsab和ST I對(duì)ECV304中VEGF mRNA表達(dá)具有抑制作用,從另一側(cè)了解普羅布考、丹參和銀杏提取物對(duì)AS的作用機(jī)制,同時(shí)提示中藥有效成分IMP和ST I在AS預(yù)防和治療中的潛在價(jià)值.Ox-LDL、LPC可以增加內(nèi)皮細(xì)胞VEGF受體KDR的高表達(dá),同時(shí)可激活ERK1/2和p38 MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑;加入VEGF受體抑制劑、ERK1/2特異性抑制劑PD98059、U012
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