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文檔簡介
1、目的:通過觀察化濁消癥軟肝方對(duì)H22肝癌小鼠移植瘤的抑制作用及調(diào)控蛋白CyclinD1、p16表達(dá)的影響,初步探索化濁消癥軟肝方對(duì)免疫器官的保護(hù)作用和防治肝癌的機(jī)制。
方法:建立昆明小鼠H22肝癌皮下移植瘤模型,隨機(jī)分為四組:模型組、化濁消癥軟肝方(中藥)組、5-氟尿嘧啶(西藥)組、化濁消癥軟肝方與5-氟尿嘧啶(聯(lián)合)組,每組10只。給藥10天期間,模型組灌胃雙蒸水和腹腔注射生理鹽水,中藥組灌胃化濁消癥軟肝方配方顆粒水溶液和腹
2、腔注射生理鹽水,西藥組灌胃雙蒸水和腹腔注射5-氟尿嘧啶(5-FU),聯(lián)合組灌胃化濁消癥軟肝方配方顆粒水溶液和腹腔注射5-FU。以上各組用藥為化濁消癥軟肝方配方顆粒水溶液0.2ml(約含生藥0.43g),5-Fu20mg/kg/d。完整剝?nèi)∧[瘤組織、胸腺及脾臟。觀察指標(biāo)(1)一般情況;(2)抑瘤率、q值及器官指數(shù);(3)腫瘤組織形態(tài)學(xué)變化;(4)瘤體CyclinD1、p16 Pr的表達(dá)。
結(jié)果:
1.一般情況:動(dòng)物造模
3、后,用藥期間無死亡。精神狀態(tài)、覓食活動(dòng)、行動(dòng)靈敏性等一般情況觀察,中藥組與聯(lián)合組優(yōu)于西藥組和模型組;
2.對(duì)H22肝癌細(xì)胞的抑制作用:頸椎脫臼處死小鼠,完整剝離腫瘤組織,計(jì)算抑瘤率。中藥組的抑瘤率為33.6%,西藥組為40.6%,聯(lián)合組為54.3%,都達(dá)了療效標(biāo)準(zhǔn),說明用藥組均具有治療作用;聯(lián)合組與中藥組相比抑瘤率升高了38.1%,聯(lián)合組與西藥組相比升高了25.2%,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,說明聯(lián)合用藥組優(yōu)于單純用藥組;
4、 3.頸椎脫臼處死小鼠,完整剝離胸腺組織、脾組織,稱重后,計(jì)算胸腺指數(shù)、脾指數(shù),小鼠體質(zhì)量按處死前稱取量來計(jì)算。中藥組與模型組相比,脾指數(shù)與胸腺指數(shù)均升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。中藥組與西藥組相比,肝癌小鼠的免疫器官指數(shù)均有顯著性提高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。中藥組與聯(lián)合組比較,免疫器官指數(shù)均升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而聯(lián)合組與西藥組相比,胸腺指數(shù)升高,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。聯(lián)合組與西藥組相比,脾指數(shù)升高,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這表明中藥能提高免疫功能,
5、對(duì)免疫器官有保護(hù)作用,5-Fu對(duì)小鼠的免疫器官有抑制作用;
4.腫瘤組織病理學(xué)形態(tài)顯示:在模型組中,腫瘤細(xì)胞生長方式為彌散或團(tuán)塊狀,細(xì)胞緊密排列,核大漿少,具有明顯的核異型性;在中藥組中,比模型組壞死的癌細(xì)胞細(xì)胞大小各異且數(shù)目多;在西藥組中,細(xì)胞排列疏松,出現(xiàn)大量的壞死細(xì)胞,細(xì)胞數(shù)目減少;在聯(lián)合組中,結(jié)締組織明顯,細(xì)胞稀疏程度增加,壞死癌細(xì)胞數(shù)目增加;
5.免疫組化顯示:CyclinD1在模型組中可見陽性表達(dá)最多,在
6、中藥組與西藥物組呈陽性表達(dá),在聯(lián)合組呈弱陽性表達(dá)。CyclinD1的表達(dá)水平:與模型組相比,中藥組降低了26.7%,西藥組降低了44.5%,聯(lián)合組降低了52.5%,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,說明用藥組治療均有效;與中藥組相比,聯(lián)合組降低了35.2%,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;與西藥組相比,聯(lián)合組降低了14.4%,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,說明聯(lián)合用藥組優(yōu)于單純用藥組。p16在模型組中呈陰性表達(dá),在中藥組和西藥組呈弱陽性表達(dá),在聯(lián)合組呈陽性表達(dá)。p16的表
7、達(dá)水平:與模型組相比,中藥組升高了14.2%,西藥組升高了29.7%,聯(lián)合組升高了48.4%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,說明用藥組治療均有效;與中藥組相比,聯(lián)合組升高了29.9%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;與西藥組相比,聯(lián)合組升高了14.4%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,說明聯(lián)合用藥組優(yōu)于單純用藥組。
結(jié)論:
1.化濁消癥軟肝方具有抑制H22肝癌移植瘤增殖的作用,其機(jī)制可能與下調(diào)腫瘤組織的CyclinD1表達(dá),上調(diào)p16的表達(dá)有關(guān)。
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