芪靈益肝煎對(duì)小鼠H22移植瘤p16基因表達(dá)及甲基化狀態(tài)的影響.pdf

1、大連醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文芪靈益肝煎對(duì)小鼠H22移植瘤p16基因表達(dá)及甲基化狀態(tài)的影響姓名：張冠中申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：左云飛20030601含有一個(gè)甲基化敏感性限制性內(nèi)切酶H p a I I 和M s pI 的酶切位點(diǎn)( C C G G ) ，分別用上述兩種酶對(duì)基因組D N A 進(jìn)行酶切后，設(shè)計(jì)特異性引物進(jìn)行P c R 擴(kuò)增，便可以檢測(cè)待測(cè)標(biāo)本的甲基化程度。H p a I I 對(duì)C 。c G G 型甲基化

2、敏感，不能將如此甲基化的位點(diǎn)切開，而M s pI 敏感的甲基化類型是。C C G G 。酶切位點(diǎn)甲基化程度越重，酶切開的越少，P c R 擴(kuò)增產(chǎn)物的量則越多，核酸酶切位點(diǎn)甲基化狀態(tài)與P c R 產(chǎn)物的量成正比。因而通過比較N S 組和Q L Y G J 組P C R 產(chǎn)物的多少，可以判斷兩組腫瘤p 1 6 啟動(dòng)子區(qū)域c p G 島甲基化狀態(tài)的差異。結(jié)果：l 芪靈益肝煎對(duì)小鼠H 2 2 移植瘤的生長(zhǎng)抑制作用：N S 對(duì)照組( n = 8

3、) 的平均瘤重為2 9 6 ±0 ．2 3 克，而Q L Y G J 治療組( n _ 8 ) 的平均瘤重為1 ．2 0 ±o ．1 7 克，抑瘤率為5 94 6 ％，治療組瘤重低于對(duì)照組( PO 0 5 ) ，H p a I I 和M s p I 酶切后的P c R產(chǎn)物Q L Y G | J 治療組均少于N S 對(duì)照組口< 0 ．0 1 ) ，說明治療組p 1 6 啟動(dòng)子區(qū)域C p G島的甲基化狀態(tài)低于對(duì)照組