胃癌p16基因啟動子CpG島甲基化研究.pdf

1、目的：腫瘤抑制基因p16基因位于染色體9p21上，全長8.5kb，由兩個內(nèi)含子和三個外顯子組成，因該蛋白分子量為15.8kD,故稱為p16。p16蛋白為細胞周期調(diào)節(jié)蛋白，它可以和細胞周期素D競爭性地與Cdk4結(jié)合。p16基因的失活可以使p16蛋白表達受到抑制，進而使細胞周期素D與Cdk4優(yōu)勢結(jié)合，使細胞生長失去控制，細胞表型發(fā)生變化，最終導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。對胃癌細胞株、胃癌及癌旁組織和癌前病變進行研究，通過對p16基因啟動子CpG島的甲基

2、化狀態(tài)和對胃癌細胞株轉(zhuǎn)錄表達的檢測，探討了甲基化與胃癌及癌前病變之間以及和其mRNA表達的關(guān)系。 方法：標本為蘭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院消化內(nèi)鏡中心所取的內(nèi)鏡下胃癌標本和本院外科的胃癌手術(shù)切除標本，其中胃癌標本31例，癌旁標本23個．胃癌細胞株為SGC-7901和BGC-823，另有癌前病變53例和正常胃粘膜組織10例。采用甲基化特異性PC剛?cè)?MSP)檢測p16基因甲基化狀態(tài)，RT-PCR方法檢測p16基因rnRNA的表達。

3、 結(jié)果：采用MSP法對兩種細胞株BGC-823和SGC-7901的p16基因啟動子區(qū)域CpG島甲基化狀態(tài)進行的檢測其結(jié)果都為陽性，而RT-PCR的檢測結(jié)果都為陰性．胃癌組織的甲基化率為74.1﹪(23/31)；癌旁組織的甲基化率為73.9﹪(17/23)；癌前病變的甲基化率為58.4﹪(31/53)；10例正常胃粘膜未能檢測到p16的甲基化狀態(tài)；胃癌組織中低分化癌和中/高分化癌甲基化率分別為85.7﹪(12/14)和64.7﹪(11/1