自體微小顆粒骨載萬(wàn)古霉素復(fù)式微球復(fù)合治療感染性骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　感染性骨缺損是指骨缺損的同時(shí)伴有感染而導(dǎo)致骨不愈合,是骨科臨床工作中遇到的較為棘手的問(wèn)題之一。感染性骨缺損通常由兩種情況造成：一是由高能量損傷導(dǎo)致嚴(yán)重的開(kāi)放性骨折、不徹底的清創(chuàng)、早期不恰當(dāng)?shù)膬?nèi)固定等因素繼發(fā)骨髓炎，導(dǎo)致肢體感染性骨缺損；二是外傷或慢性疾病導(dǎo)致的肢體軟組織缺損感染，引起骨質(zhì)破壞，骨質(zhì)吸收或死骨排出形成慢性骨髓炎進(jìn)而導(dǎo)致肢體感染性骨缺損。感染性骨缺損治療的難點(diǎn)主要有：一是局部骨組織抗感染能力差、局部感染難以

2、控制，使骨組織的修復(fù)受阻造成的；二是骨缺損處骨組織的填充修復(fù)。在臨床治療中發(fā)現(xiàn)引起感染性骨缺損的最常見(jiàn)病原體是革蘭氏染色陽(yáng)性的金黃色葡萄球菌，高達(dá)80%的病例中可分離到金黃色葡萄球菌。萬(wàn)古霉素是目前臨床上治療MRSA(耐甲氧西林金黃色葡萄球菌)感染疾病首選用藥。臨床上多采用靜脈應(yīng)用敏感抗生素4～6周來(lái)控制感染。由于其生物半衰期短、易耐藥、需要大量反復(fù)使用，經(jīng)靜脈滴注造成腎毒性、耳毒性之外還有諸多的副作用，因此局部抗生素緩釋系統(tǒng)的運(yùn)用越來(lái)

3、越受到人們的重視。本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)了一種新的抗菌素緩釋系統(tǒng)（載萬(wàn)古霉素的PLGA/CS復(fù)式緩釋微球），該復(fù)式載藥微球可緩慢、持續(xù)的釋放抗生素以提高病變部位的抗生素濃度達(dá)到有效控制感染的目的，并且該復(fù)式載藥微球可降解、對(duì)人體無(wú)害，不影響骨細(xì)胞的活性。該復(fù)式微球前期進(jìn)行的體外實(shí)驗(yàn)已獲得較好的抗菌效果。本研究將在動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)以檢驗(yàn)載萬(wàn)古霉素復(fù)式微球結(jié)合自體微小顆粒骨支架的抗菌及對(duì)骨缺損的修復(fù)效果，探索一種感染性骨缺損治療的新方法，為其臨床應(yīng)用提供實(shí)

4、驗(yàn)依據(jù)。
　　實(shí)驗(yàn)方法：
　　取48只健康新西蘭大耳白兔，按沈霖造模法造成雙側(cè)橈骨中上段骨髓炎模型兔。4周后根據(jù)清創(chuàng)術(shù)的操作規(guī)范對(duì)骨髓炎局部進(jìn)行規(guī)范徹底清創(chuàng)，咬除死骨并擴(kuò)大咬除范圍以便在橈骨中上段造成長(zhǎng)度1.5cm的節(jié)段性骨缺損，將造模成功后的新西蘭大耳白兔隨機(jī)分為3組，每組16只。A組在骨缺損區(qū)植入自體微小顆粒骨進(jìn)行治療；B組在骨缺損區(qū)植入自體微小顆粒骨和萬(wàn)古霉素進(jìn)行治療；C組在骨缺損區(qū)植入自體微小顆粒骨和載萬(wàn)古霉素的PL

5、GA/CS緩釋微球微球進(jìn)行治療。分別測(cè)定術(shù)前1天、術(shù)后1天、術(shù)后3天、術(shù)后1周、術(shù)后2周、術(shù)后4周各時(shí)間點(diǎn)每只家兔CRP（血清C反應(yīng)蛋白）和ESR（血沉），并于術(shù)后2周、術(shù)后4周、術(shù)后8周、術(shù)后12周各時(shí)間點(diǎn)每組隨機(jī)處死4只家兔觀(guān)察植骨區(qū)大體形態(tài)，影像學(xué)X線(xiàn)和組織學(xué)結(jié)果并進(jìn)行評(píng)分。
　　結(jié)果：
　　1.一般情況：術(shù)后各家兔分籠喂養(yǎng)，無(wú)一例死亡。術(shù)后1～2d所有兔精神、飲食稍差,活動(dòng)少,無(wú)畏寒發(fā)熱征象。手術(shù)傷口無(wú)紅腫、滲液等。

6、3d后精神好轉(zhuǎn),飲食正常,活動(dòng)增加。
　　2.大體形態(tài)觀(guān)察：術(shù)后2周，A組1只家兔植骨部位出現(xiàn)竇道，流出膿性分泌物，A、B、C組中其余家兔骨缺損處均以肉芽組織橋接,骨折端間沒(méi)有連接，大體上無(wú)明顯差異,C組肉芽組織量略多；術(shù)后4周，A組骨缺損處被纖維組織覆蓋,B、C組兩骨折斷端間為軟骨痂所填充，類(lèi)似軟骨組織；術(shù)后8周，C組軟骨痂已被明顯的硬骨痂所取代，硬骨痂成紅褐色，硬骨痂變致密，A、B組上述演變稍差，A組最差只有少部分軟骨痂被硬骨

7、痂取代；術(shù)后12周，各組缺損段基本愈合完畢，C組硬骨痂表面開(kāi)始出現(xiàn)骨皮質(zhì)樣的光滑致密表面，剖面中心部位變疏松，有髓腔形成。
　　3.血清C反應(yīng)蛋白：術(shù)后第1周時(shí)CRP（血清C反應(yīng)蛋白）檢測(cè)值C組低于B組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.05），B組低于A組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.05），第4周時(shí)CRP（血清C反應(yīng)蛋白）檢測(cè)值A(chǔ)組仍處在較高的水平，B、C組基本達(dá)到正常水平。
　　4.血沉：術(shù)后第2周時(shí)ESR（血沉）檢測(cè)值C組低于

8、B組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.05），B組低于A組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.05），第4周時(shí)ESR（血沉）檢測(cè)值A(chǔ)組仍處在較高的水平，B、C組基本達(dá)到正常水平。
　　5.植骨區(qū)影像學(xué)X線(xiàn)觀(guān)察及評(píng)分： Lane-Sandhu X線(xiàn)評(píng)分示：術(shù)后2、4、8周 C組X線(xiàn)評(píng)分明顯優(yōu)于A、B組（P<0.05），B組優(yōu)于 A組（P<0.05）；術(shù)后第12周X線(xiàn)6.評(píng)分A、B、C組3組分值相比差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
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9、.植骨區(qū)組織學(xué)觀(guān)察及評(píng)分：Lane-Sandhu組織學(xué)評(píng)分示：術(shù)后2、4、8周C組組織學(xué)評(píng)分明顯優(yōu)于 A、B組（P<0.05），B組優(yōu)于A組（P<0.05）；術(shù)后12周B、C組組織學(xué)評(píng)分優(yōu)于A組（P<0.05），B、C組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　結(jié)論：
　　1、治療兔感染性骨缺損時(shí)與自體微小顆粒骨植入組相比，自體微小顆粒骨載萬(wàn)古霉素組和自體微小顆粒骨載萬(wàn)古霉素PLGA/CS復(fù)式微球組的抗感染能力更強(qiáng)。