廣譜caspase抑制劑對大鼠燒傷后腎臟的保護作用.pdf

1、目的：
　　腎臟組織損傷是嚴(yán)重?zé)齻筝^早出現(xiàn)的并發(fā)癥，急性腎功能不全是臨床上重度燒傷患者常見的死亡原因，重度燒傷所致的腎損傷與微血管損傷、自由基生成增多、Ca2+穩(wěn)態(tài)失衡、多種細胞因子、嘌呤池耗竭和細胞凋亡等多種因素有關(guān)。其中細胞凋亡在急性腎功能不全的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮了重要作用。本實驗通過建立大鼠燒傷模型，并且應(yīng)用z-VAD-fmk進行早期干預(yù)，檢測腎組織的病理改變，腎臟細胞的凋亡情況及caspase-3活性，研究其對大鼠燒傷后腎

2、損傷的保護作用，并分析其臨床意義。
　　方法：
　　72只雄性Wistar大鼠隨機分為對照組、致傷組、給藥組，每組24只，各組設(shè)2h、8h、24h、48h共4個相應(yīng)時段，每時段6只，給藥組致傷后即刻經(jīng)尾靜脈注射z-VAD-fmk3mg/kg，以后以1.5mg/kg的劑量經(jīng)腹腔每12h注射一次，致傷組用同樣方法注射與給藥組等體積的生理鹽水，對照組不做處理，致傷組和給藥組燒傷后用Parkland公式補液，并根據(jù)給藥量相應(yīng)減少補液

3、量，分別于上述各時段處死大鼠并留取腎臟組織，行HE染色觀察腎組織的病理改變，
　　TUNEL法檢測腎臟細胞的凋亡，熒光比色法檢測caspase-3活性。結(jié)果：
　　1.病理學(xué)改變：對照組大鼠腎小管上皮細胞完整，排列整齊，腎組織結(jié)構(gòu)清晰；致傷組：傷后2h，腎臟組織出現(xiàn)病理改變，腎小管輕度擴張，細胞水腫；8、24h，病變進一步加重，腎小管上皮細胞部分壞死脫落，腎小管擴張明顯，可見炎細胞浸潤及管型形成；48h改變稍有好轉(zhuǎn)；給藥組傷

4、后2h腎小球及腎小管結(jié)構(gòu)基本正常，僅見輕度水腫的腎小管上皮細胞；8h和24h組細胞脫落、腎小管擴張及管型形成均較對照組減輕，可見少量炎細胞浸潤及管型形成；48h組細胞水腫減輕，管型減少，腎小管擴張改善。
　　2.TUNEL染色結(jié)果顯示：細胞凋亡參與了重度燒傷大鼠的腎損傷。正常細胞核染色呈淡藍色，凋亡細胞核呈棕黃或者棕褐色。對照組僅可見極少量凋亡細胞，致傷組和給藥組在傷后2h凋亡細胞開始增多，持續(xù)至48h仍較明顯。與對照組相比，致傷

5、組和給藥組在傷后各時相點腎臟細胞凋亡數(shù)量明顯增多（P<0.01）；與致傷組相比，給藥組腎臟細胞凋亡數(shù)在燒傷8h、24h及48h后明顯降低(P<0.01)。
　　3.熒光比色法顯示：重度燒傷后致傷組與給藥組細胞凋亡相關(guān)酶caspase-3活性均升高。致傷組和給藥組caspase-3活性于各時相點均高于對照組，給藥組腎臟組織caspase-3活性在傷后2h、8h、24h及48h均明顯低于致傷組（P<0.01）。結(jié)論：
　　1.重