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1、目的:通過(guò)制作腦外傷大鼠模型,引入鈣蛋白酶抑制劑對(duì)模型進(jìn)行干預(yù),探討鈣蛋白酶與腦外傷細(xì)胞凋亡之間的關(guān)系以及鈣蛋白酶抑制劑能否對(duì)神經(jīng)細(xì)胞的凋亡產(chǎn)生抑制作用,為完善臨床腦外傷的治療提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法:將84只老鼠分成3個(gè)獨(dú)立的大組:1.空白組(制作大鼠腦外傷模型前半小時(shí)無(wú)需向腦室注射任何試劑),2.生理鹽水組(制作大鼠腦外傷模型前半小時(shí)向腦室注入生理鹽水),3.鈣蛋白酶抑制劑組(制作大鼠腦外傷模型前半小時(shí)向腦室注入鈣蛋白酶抑
2、制劑)。每個(gè)大組分別在以下7個(gè)時(shí)間點(diǎn)中的任何一個(gè)時(shí)間點(diǎn)分配4只大鼠:30min,lh,3h,6h,1d,3d,7d。制作大鼠腦損傷模型,到達(dá)時(shí)間點(diǎn)后處死大鼠,取海馬區(qū)腦組織做TUNEL凋亡染色,在高倍鏡下讀出凋亡細(xì)胞數(shù)目。另取84只大鼠同樣分組,制作腦損傷模型,用來(lái)做鈣蛋白酶活性測(cè)量。最后得出結(jié)果,1.以重復(fù)測(cè)量數(shù)據(jù)的方差分析對(duì)各檢測(cè)凋亡細(xì)胞數(shù)組和檢測(cè)鈣蛋白酶活性組結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì),2以直線(xiàn)相關(guān)分析對(duì)檢測(cè)凋亡細(xì)胞組和檢測(cè)鈣蛋白酶活性組結(jié)果之
3、間進(jìn)行統(tǒng)計(jì),得到結(jié)論(設(shè)p<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義)。 結(jié)果:3組(空白組,生理鹽水組和鈣蛋白酶抑制劑組)24小時(shí)內(nèi)凋亡細(xì)胞數(shù)目均上升,并且在1天之內(nèi)形成高峰,之后開(kāi)始下降。從30分鐘到7天,空白組的凋亡細(xì)胞數(shù)為:70.25±3.69、70.25±2.68、72.25±1.30、75.25±0.90、89.25±2.49、81.25±0.83、70.25±2.49。生理鹽水組在7個(gè)時(shí)間點(diǎn)的凋亡細(xì)胞數(shù)為:74.25±2.46、71
4、.50±1.50,74.25±1.92、77.75±1.09、87.25±2.30、 80.50±3.04、 72.25±1.48。以上2組數(shù)值總體比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),而鈣蛋白酶抑制劑組在7個(gè)時(shí)間點(diǎn)的凋亡細(xì)胞數(shù)為:65.75±2.95、68.50±1.09、70.50±1.12、70.50±1.29、74.00±5.61、72.75±2.95、69.25±1.68,分別和其他2組在數(shù)值總體相比具有顯著差別(P<0.01);
5、空白組,生理鹽水組和鈣蛋白酶抑制劑組在24小時(shí)內(nèi)鈣蛋白酶活性上升,并且在1天內(nèi)到達(dá)高峰,之后開(kāi)始下降??瞻捉M在7個(gè)時(shí)間點(diǎn)的鈣蛋白酶活性為:1.723±0.24、1.856±0.21、1.9134±0.41、1.921±0.42、2.483±0.27、2.318±0.43、2.401±0.21。生理鹽水組在7個(gè)時(shí)間點(diǎn)鈣蛋白酶活性為:1.736±0.26、1.844±0.24、1.922±0.32、1.926±0.33、2.543±0.28
6、、2.326±0.44、2.178±0.26。以上2組數(shù)值總體比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),而鈣蛋白酶抑制劑組在7個(gè)時(shí)間點(diǎn)的鈣蛋白酶活性為:1.719±0.32、1.818±0.37、1.83±0.36、1.836±0.31、2.141±0.34、2.024±0.31、1.92±0.27。分別和其他2組數(shù)值總體相比,具有有顯著差別(P<0.01)。凋亡細(xì)胞組的多少和鈣蛋白酶活性有明顯相關(guān)性(P<0.01,r=0.5643>0)。
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