口服質(zhì)子泵抑制劑對(duì)胃食管反流病患者胃腸道微生態(tài)影響研究.pdf

1、背景和目的：胃食管反流?。℅astroesophageal Reflux Disease，GERD）患者是長(zhǎng)期服用質(zhì)子泵抑制劑（Proton Pump Inhibitors，PPI）的主要人群，而質(zhì)子泵抑制劑可能會(huì)影響胃腸道微生態(tài)，增加胃腸道細(xì)菌過(guò)度生長(zhǎng)和艱難梭菌感染風(fēng)險(xiǎn)，但缺乏系統(tǒng)研究，特別是基于高通量測(cè)序技術(shù)的相關(guān)研究極少。本文首次利用高通量測(cè)序技術(shù)，對(duì)長(zhǎng)期服用質(zhì)子泵抑制劑的胃食管反流病患者胃黏膜及糞便微生態(tài)進(jìn)行系統(tǒng)研究。
　

2、　方法：2013年06月至2014年08月，在我院內(nèi)鏡中心及門診對(duì)符合納入標(biāo)準(zhǔn)的胃食管反流病患者分成未服用質(zhì)子泵抑制劑組（G1）、服用質(zhì)子泵抑制劑2個(gè)月到1年組（G2）和大于1年組（G3），并募集匹配的健康對(duì)照人群組（H）。收集各組研究對(duì)象的胃黏膜活檢樣本和/或糞便樣本，通過(guò)16S-rDNA高度可變區(qū)V4區(qū)高通量測(cè)序和生物信息學(xué)技術(shù)對(duì)胃黏膜和糞便樣本的微生態(tài)分別進(jìn)行比較分析。
　　結(jié)果：共收集40例研究對(duì)象的胃黏膜活檢樣本（G1=

3、10，G2=10，G3=10，H=10）和55例研究對(duì)象的糞便樣本（G1=15，G2=10，G3=15，H=15），各組間年齡、性別和體重指數(shù)均無(wú)顯著差異（P＞0.05）。?胃黏膜微生態(tài)分析顯示：G1、G2、G3的OTUs顯著大于H組（P＜0.05）；多組間兩兩比較統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示Chloroflexi（綠彎菌門）和Nitrospirae（硝化螺旋菌門）在H組的相對(duì)豐度顯著小于G1、G2、G3組（P＜0.008），而在G1、G2、G3三組之

4、間則無(wú)顯著區(qū)別。Crenarchaeota（泉古菌門）和Euryarchaeota（廣古菌門）在健康對(duì)照組的相對(duì)豐度顯著小于G1組（P＜0.008），而與G2、G3組則無(wú)顯著差異。Crenarchaeota（泉古菌門）在G1組的相對(duì)豐度顯著大于G2、G3組（P＜0.008），Euryarchaeota（廣古菌門）在 G1組的相對(duì)豐度也顯著大于G3組（P＜0.008）。G2組和G3組在門水平則無(wú)統(tǒng)計(jì)差異細(xì)菌；Helicobacter（螺桿

5、菌屬）在H組的相對(duì)豐度顯著高于G3組（P＜0.008），而與G1、G2無(wú)統(tǒng)計(jì)差異。Pseudomonas（假單胞菌屬）、Herbaspirillum（草螺菌屬）在G3組的相對(duì)豐度顯著高于G1組（P＜0.008），而與G2組無(wú)統(tǒng)計(jì)差異。Pelobacter（桿菌屬）、Desulfuromonas（除硫單胞菌屬）在G2、G3組的相對(duì)豐度顯著低于G1組（P＜0.008），而顯著高于健康對(duì)照組（H）（P＜0.008）。G2和 G3組在屬水平?jīng)]有

6、顯著差異細(xì)菌。非權(quán)重PcoA、ANOSIM和MRPP分析顯示G1、G2、G3三組群落結(jié)構(gòu)多樣性與H組可顯著區(qū)分開(kāi)，并且G1組與G3組的群落結(jié)構(gòu)多樣性也可顯著區(qū)分開(kāi)。?糞便微生態(tài)分析顯示：G1、G2、G3的OTUs顯著小于H組（P＜0.05）；多組間兩兩比較統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示 Verrucomicrobia（疣微菌門）、Crenarchaeota（泉古菌門）、Acidobacteria（酸桿菌門）等在H組的相對(duì)豐度均顯著大于G1、G2、G3組（

7、P＜0.008）。Cyanobacteria（藍(lán)藻門）、Spirochaetes（螺旋體門）在G3組的相對(duì)豐度顯著低于H組（P＜0.008），而與G1、G2組無(wú)統(tǒng)計(jì)差異。G2和G3組在門水平無(wú)統(tǒng)計(jì)差異細(xì)菌；Dorea、Halomonas（嗜鹽單胞菌屬）在H組的相對(duì)豐度顯著大于 G1、G2、G3組（P＜0.008）。Turicibacter、Clostridium（梭菌屬）在G2、G3組的相對(duì)豐度顯著大于健康對(duì)照組（P＜0.008），而在

8、G1組的相對(duì)豐度也大于健康對(duì)照組但無(wú)統(tǒng)計(jì)差異。Haloarcula（鹽盒菌屬）在G2組的相對(duì)豐度顯著高于G1組（P＜0.008），在G3組的相對(duì)豐度也大于G1組，但無(wú)統(tǒng)計(jì)差異。Rothia（羅氏菌屬）在 G2組的相對(duì)豐度顯著高于 G1組（P＜0.008），但在其他組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)差異。G2和G3組在屬水平?jīng)]有顯著差異細(xì)菌。
　　結(jié)論：胃食管反流病未服用及服用質(zhì)子泵抑制劑的患者胃黏膜和糞便微生態(tài)物種豐富度和群落結(jié)構(gòu)多樣性與健康對(duì)照人群均