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文檔簡介
1、目的:研究大豆皂甙對D-半乳糖所致小鼠衰老的延緩作用及其機(jī)制。
方法:50只昆明小鼠分組,分為實驗空白對照、實驗D-半乳糖模型、大豆皂甙低劑(L)量組(50mg/kg)、高劑(H)量組(100mg/kg)和維生素E組,每組各10只??瞻讓φ战M每日皮下打針0.7%的NaCl溶液,每次300mg/kg,其它各組每日在相同部位注射相同體積的D-gal,每天注射,不間斷共7周。注射D-gal的同時,分別對L組、H組和維生素E組小鼠進(jìn)行
2、灌胃,劑量分別是50mg/kg、100mg/kg、50mg/kg,對空白對照組和模型組進(jìn)行等體積0.7%的NaCl溶液灌胃。末次給藥后斷食不斷水,半天后對小鼠進(jìn)行取血取肝臟和心臟。取血獲得血清后進(jìn)行8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)、晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)活性衰老指標(biāo)的檢測;超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、單胺氧化酶(MAO)生化指標(biāo)的檢測;腫瘤壞死因子(TNF-α)、細(xì)胞白介素-1(IL-1β)、一氧化氮(NO),前
3、列腺素(PEG-2)炎性學(xué)指標(biāo)的檢測。取肝臟、心臟部分制成蠟塊進(jìn)行HE染色用于形態(tài)學(xué)檢測;取小塊肝臟、心臟進(jìn)行電鏡影像學(xué)檢測;取部分肝臟、心臟進(jìn)行研磨離心后進(jìn)行SOD、MDA、MAO、NO、iNOS生化指標(biāo)地檢驗;再取制成勻漿的肝組織、心臟組織通過蛋白印跡法對COX-2、HO-1、iNOS重要治療靶點進(jìn)行檢測以及NF-κB通路的檢測。
結(jié)果:⑴對小鼠血清的檢測:與空白對照組比較,D-gal組8-羥基脫氧鳥苷和晚期糖基化終末產(chǎn)物
4、(AGEs)活性明顯升高(P<0.01),與D-gal組比較,大豆皂甙處理組8-羥基脫氧鳥苷和晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)活性明顯降低(P<0.01)。與空白對照組比較,D-gal組SOD活性降低(P<0.01),與D-gal組比較,大豆皂甙組SOD活性明顯上升(P<0.01);與空白對照組比較,D-gal組MDA、MAO活性明顯升高(P<0.01),與D-gal組比較,大豆皂甙處理組MDA、MAO活性明顯降低(P<0.01);與空白
5、對照組比較,D-gal組TNF-α、IL-1β、NO和PEG2含量明顯升高(P<0.01),與D-gal組比較,大豆皂甙處理組TNF-α、IL-1β、NO和PEG2含量明顯降低(P<0.01)。⑵對小鼠肝臟、心臟組織的檢測:與空白對照組比較,D-gal組SOD活性下降(P<0.01),與D-gal組比較,大豆皂甙組SOD活性明顯升高(P<0.01);與空白對照組比較,D-gal組MDA、MAO性明顯升高(P<0.01),與D-gal組比
6、較,大豆皂甙處理組MDA、MAO活力明顯下降低(P<0.01);與空白對照組比較,D-gal組iNOS、NO含有量明顯升高(P<0.01),與D-gal組比較,大豆皂甙組iNOS、NO含有量明顯下降(P<0.01);肝臟、心臟組織HE染色表明,大豆皂甙對D-gal所致小鼠衰老具有延緩作用;肝臟、心臟組織電鏡表明,大豆皂甙對D-gal所致小鼠衰老具有延緩作用;蛋白印跡法檢測肝臟、心臟損傷的重要治療靶點,與空白對照組比較,D-gal模型組C
7、OX-2、HO-1及iNOS表達(dá)明顯升高,與D-gal組比較,大豆皂甙處理組COX-2、HO-1及iNOS表達(dá)明顯降低;對細(xì)胞上游信號通路中的NF-κB及p-NF-κB蛋白進(jìn)行檢測,與空白對照組比較,D-gal組NF-κB及p-NF-κB表達(dá)明顯升高,與D-gal組比較,大豆皂甙處理組NF-κB及p-NF-κB表達(dá)明顯降低。
結(jié)論:大豆皂甙對D-半乳糖所致小鼠具有延緩衰老的作用,大豆皂甙能夠提高D-半乳糖所致衰老小鼠SOD活力
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