適量運(yùn)動(dòng)對(duì)D-半乳糖致衰老小鼠SVZ相關(guān)區(qū)域神經(jīng)發(fā)生的影響.pdf

1、目的：以青年昆明小鼠為研究對(duì)象，注射D-半乳糖制備小鼠急性致衰老模型，對(duì)模型小鼠加以運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練，觀察運(yùn)動(dòng)對(duì)模型組小鼠的衰老狀態(tài)的改善情況，并證明適量運(yùn)動(dòng)可促進(jìn)急性致衰小鼠SVZ相關(guān)區(qū)域的神經(jīng)發(fā)生。
　　方法：選取1月齡雄性昆明小鼠40只，體重在20-25g，隨機(jī)分為4組，每組10只。分別是對(duì)照組，對(duì)照運(yùn)動(dòng)組(對(duì)運(yùn)組)，模型組和模型運(yùn)動(dòng)組(模運(yùn)組)。模運(yùn)組小鼠每天注射D-半乳糖125mg/kg，連續(xù)8周，使其急性致衰。對(duì)運(yùn)組和模運(yùn)組小

2、鼠每天進(jìn)行適量強(qiáng)度的跑步運(yùn)動(dòng)，連續(xù)運(yùn)動(dòng)8周。打藥和運(yùn)動(dòng)同步進(jìn)行。Morris水迷宮試驗(yàn)：待給藥及運(yùn)動(dòng)因素結(jié)束后，小鼠于迷宮實(shí)驗(yàn)室環(huán)境下飼養(yǎng)1天，開始定位航行試驗(yàn)，通過小鼠的上臺(tái)潛伏期考察小鼠學(xué)習(xí)能力，平臺(tái)放入水迷宮4個(gè)象限中的一個(gè)，其相鄰兩個(gè)象限的中點(diǎn)和對(duì)側(cè)象限邊緣兩個(gè)點(diǎn)（共4個(gè)）為小鼠入水點(diǎn)，依次從這四個(gè)點(diǎn)將小鼠面向池壁放入水中，視頻采集系統(tǒng)跟蹤并記錄找到平臺(tái)所需的時(shí)間和軌跡。5天后撤去平臺(tái)進(jìn)行空間探索實(shí)驗(yàn)，記錄小鼠60s內(nèi)跨越平臺(tái)的

3、次數(shù)來評(píng)判其記憶能力。組織切片制備及觀察：水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，將輸液針刺入小鼠左心室，同時(shí)剪開右心耳，用生理鹽水沖洗，4％多聚甲醛灌注。取腦組織，制備石蠟切片，挑選SVZ相關(guān)區(qū)域(包括部分SVZ區(qū)和部分吻側(cè)遷移流)的石蠟切片，分別進(jìn)行HE染色，以及Sox-2、Ki-67和DCX免疫組化染色。
　　結(jié)果：⑴Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果：各組定位巡航試驗(yàn)的潛伏期存在差異(P<0.05)：對(duì)照組短于模型組，模運(yùn)組短于模型組，甚至短于對(duì)照組(

4、P<0.05)。運(yùn)動(dòng)組短于模型組(P<0.05)，對(duì)運(yùn)組小鼠的定位巡航時(shí)間短于對(duì)照組小鼠(P<0.05)。模運(yùn)組穿越平臺(tái)次數(shù)多于模型組(P<0.05)，對(duì)運(yùn)組穿越平臺(tái)次數(shù)多于對(duì)照組(P<0.05)，模型組小鼠穿臺(tái)次數(shù)低于對(duì)照組，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；⑵HE染色結(jié)果顯示：對(duì)照組和對(duì)運(yùn)組皮質(zhì)區(qū)神經(jīng)細(xì)胞排列整齊，染色均勻，形態(tài)良好，而模型組和模運(yùn)組細(xì)胞數(shù)量減少，有較多細(xì)胞出現(xiàn)核深染、核固縮現(xiàn)象。模型組和模運(yùn)組的變性細(xì)胞比例均顯著高于

5、對(duì)照組(P<0.05)，模運(yùn)組變性細(xì)胞比例低于模型組(P<0.05)，對(duì)運(yùn)組變性細(xì)胞比例低于對(duì)照組(P<0.05)；⑶Sox-2、Ki-67和DCX免疫組化染色結(jié)果：計(jì)數(shù) SVZ區(qū)相關(guān)區(qū)域的Sox-2、Ki-67和DCX陽性細(xì)胞數(shù)發(fā)現(xiàn)，模型組三組染色陽性細(xì)胞數(shù)均少于對(duì)照組(P<0.05)，模運(yùn)組三組染色陽性細(xì)胞數(shù)均高于模型組(P<0.05)，Ki-67和Sox-2陽性細(xì)胞數(shù)甚至高于正常組小鼠水平(P<0.05)，對(duì)運(yùn)組小鼠的陽性細(xì)胞數(shù)多