大鼠脂肪組織與坐骨神經(jīng)來源的許旺細(xì)胞培養(yǎng)及示蹤的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：探討從SD乳鼠皮下脂肪組織及坐骨神經(jīng)中獲取許旺細(xì)胞以及應(yīng)用超順磁性納米鐵顆粒（SPIO）體外標(biāo)記許旺細(xì)胞的可行性。
　　 方法：顯微鏡下切取SD 乳鼠皮下脂肪組織，差速分離純化獲得類許旺細(xì)胞，研究其生物學(xué)特性及組織內(nèi)定位，并應(yīng)用于硅膠管內(nèi)，修復(fù)10mm 長坐骨神經(jīng)缺損。切取乳鼠坐骨神經(jīng)，應(yīng)用Dispase II 酶純化獲得許旺細(xì)胞。應(yīng)用SPIO 標(biāo)記后，行普魯士藍(lán)染色、透射電鏡及MTT 檢測，研究標(biāo)記后許旺細(xì)胞的生物學(xué)特性

2、及MRI 成像示蹤。
　　 結(jié)果：從SD乳鼠皮下脂肪組織中分離純化的類許旺細(xì)胞，表達(dá)許旺細(xì)胞特異性標(biāo)記，其陽性部位在小血管周圍。術(shù)后4 周，神經(jīng)再生已通過橋接神經(jīng)的硅膠管，長至坐骨神經(jīng)的遠(yuǎn)端。經(jīng)過Dispase II 酶的差速純化，可以從SD 乳鼠坐骨神經(jīng)中獲得大量高純度的許旺細(xì)胞。將SPIO 與許旺細(xì)胞共同培養(yǎng)24 小時(shí)后，普魯士藍(lán)染色見細(xì)胞內(nèi)藍(lán)染的鐵顆粒，透射電鏡證實(shí)鐵顆粒位于細(xì)胞的吞噬泡或溶酶體中，體外MRI 呈明顯的低信