蛭龍活血通瘀膠囊拆方組分對(duì)高血壓血管重構(gòu)的影響.pdf

1、目的：觀察蛭龍活血通瘀膠囊拆方組分對(duì)大鼠血清丙二醇(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)含量和血管NF-κB、ICAM-1表達(dá)的影響，探討它們對(duì)高血壓血管重構(gòu)的影響及作用機(jī)制。
　　方法：雄性Wistar大鼠110只，采用單純隨機(jī)抽樣法抽取正常組12只、假手術(shù)組12只。其余大鼠予以腎性高血壓大鼠模型建立，其手術(shù)方式為縮窄左腎動(dòng)脈;于2周后篩選模型成功大鼠77只。第7周，從77只大鼠中采用單純隨機(jī)抽樣法抽取模型組10只、卡托普利組10

2、只、全方組10只、補(bǔ)氣組10只、溫通經(jīng)絡(luò)組10只、活血化瘀組10只。分別以相應(yīng)藥物1次/日給予灌胃，正常組、假手術(shù)組以及模型組予以同體積生理鹽水。經(jīng)4周灌胃后，大鼠腹主動(dòng)脈進(jìn)行取血，以制備血清。運(yùn)用化學(xué)比色法測(cè)量血清MDA、SOD含量。取大鼠胸主動(dòng)脈，經(jīng)HE染色后，電鏡下觀察血管中膜變化，并測(cè)量血管中膜厚度(MT)、管腔內(nèi)徑(LD)、血管中膜厚度/管腔內(nèi)徑比(MT/LD)。運(yùn)用免疫組化染色方法檢測(cè)血管NF-κB、ICAM-1表達(dá)，并用w

3、estern blot的方法進(jìn)一步檢測(cè)血管ICAM-1表達(dá)。
　　結(jié)果：⑴藥物對(duì)血壓的影響：大鼠基礎(chǔ)血壓值:各組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；手術(shù)后2周及6周大鼠血壓值:正常組和假手術(shù)組比較，血壓值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);模型組較正常組和假手術(shù)組顯著升高(P＜0.05);模型組血壓值均超過150mmHg，且較基礎(chǔ)血壓升高20mmHg。模型組與各治療組比較及各治療組間比較血壓值差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；用藥4周后大鼠血壓:正常組和假手術(shù)組

4、比較，血壓值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，且均較其余各組顯著降低(P＜0.05);模型組較正常組、假手術(shù)組及各治療組顯著升高(P＜0.05);卡托普利組較全方組降低不顯著(P＞0.05)，較余治療組顯著降低(P＜0.05);且補(bǔ)氣組較活血化瘀組降低不顯著(P＞0.05)，較溫通經(jīng)絡(luò)組顯著降低(P＜0.05)。⑵藥物對(duì)腎性高血壓大鼠氧化應(yīng)激的影響：藥物對(duì)腎性高血壓大鼠血清MDA的影響:正常組和假手術(shù)組比較，血清MDA值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

5、(P＞0.05)，且均較其余各組顯著降低(P＜0.05);模型組較補(bǔ)氣組、活血化瘀組升高不顯著(P＞0.05)，較假手術(shù)組、正常組及余治療組顯著升高(P＜0.05)，且補(bǔ)氣組較活血化瘀組升高不顯著(P＞0.05);全方組較卡托普利組升高不顯著(P＞0.05)，較溫通經(jīng)絡(luò)組及活血化瘀組顯著降低(P＜0.05)，且活血化瘀組較溫通經(jīng)絡(luò)組升高不顯著(P＞0.05)；藥物對(duì)腎性高血壓大鼠血清SOD的影響:正常組和假手術(shù)組比較，血清SOD值差異無

6、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，且均較其余各組顯著升高(P＜0.05);模型組較補(bǔ)氣組、溫通經(jīng)絡(luò)組、活血化瘀組降低不顯著(P＞0.05)，較其余各治療組顯著降低(P＜0.05);且溫通經(jīng)絡(luò)組較活血化瘀組降低不顯著(P＞0.05)，較補(bǔ)氣組升高不顯著(P＞0.05);卡托普利組較全方組及活血化瘀組升高不顯著(P＞0.05)，且全方組較活血化瘀組升高不顯著(P＞0.05)。⑶藥物對(duì)腎性高血壓大鼠胸主動(dòng)脈中膜的影響:正常組及假手術(shù)組血管中膜可見平

7、滑肌細(xì)胞排列大致整齊，未見肥大、增生。模型組血管中膜可見中膜明顯增厚，平滑肌細(xì)胞數(shù)增加，排列紊亂;彈力纖維增生，以及斷裂;偶可見泡沫細(xì)胞。經(jīng)治療后，卡托普利組、全方組、補(bǔ)氣組平滑肌細(xì)胞和彈力纖維增生程度較模型組明顯降低，溫通經(jīng)絡(luò)組、活血化瘀組較模型組增生程度輕度降低。⑷藥物對(duì)腎性高血壓大鼠胸主動(dòng)脈MT、LD、MT/LD的影響：藥物對(duì)腎性高血壓大鼠胸主動(dòng)脈MT的影響:正常組和假手術(shù)組比較，MT值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，且均較其余

8、各組顯著降低(P＜0.05);模型組較各治療組顯著升高(P＜0.05);卡托普利組較全方組降低不顯著(P＞0.05)，較余各藥物組顯著降低(P＜0.05);補(bǔ)氣組較全方組升高不顯著(P＞0.05)，較溫通經(jīng)絡(luò)組及活血化瘀組降低不顯著(P＞0.05)，且溫通經(jīng)絡(luò)組較活血化瘀組減低不顯著(P＞0.05)；藥物對(duì)腎性高血壓大鼠胸主動(dòng)脈LD的影響:正常組和假手術(shù)組比較，LD值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，且均較其余各組顯著升高(P＜0.05

9、);模型組較活血化瘀組及溫通經(jīng)絡(luò)組降低不顯著(P＞0.05)，且活血化瘀組較溫通經(jīng)絡(luò)組升高不顯著(P＞0.05);各治療組顯著降低(P＜0.05);卡托普利組較余治療組顯著升高(P＜0.05);補(bǔ)氣組較全方組顯著降低(P＜0.05)，較活血化瘀組及溫通經(jīng)絡(luò)組升高不顯著(P＞0.05)；藥物對(duì)腎性高血壓大鼠胸主動(dòng)脈MT/LD的影響:正常組和假手術(shù)組比較，MT/LD值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，且均較其余各組顯著升高(P＜0.05);

10、模型組較各治療組顯著降低(P＜0.05);卡托普利組較余治療組顯著升高(P＜0.05);補(bǔ)氣組較全方組顯著降低(P＜0.05)，較活血化瘀組及溫通經(jīng)絡(luò)組顯著升高(P＜0.05)，且活血化瘀組較溫通經(jīng)絡(luò)組升高不顯著(P＞0.05)。⑸藥物對(duì)高血壓大鼠胸主動(dòng)脈NF-κB蛋白表達(dá)的影響（免疫組化法）:電鏡下，棕黃色顆粒為NF-κB蛋白陽性表達(dá)，主要分布于血管中膜平滑肌。正常組及假手術(shù)組可見少量的棕黃色顆粒;模型組可見散在分布的大量表達(dá)棕黃色顆

11、粒;經(jīng)治療后，卡托普利組、全方組表達(dá)較模型組明顯減少，補(bǔ)氣組、溫通經(jīng)絡(luò)組、活血化瘀組表達(dá)較模型組有所減少。其中卡托普利組較全方組有所減少;補(bǔ)氣組較活血化瘀組表達(dá)明顯減少，與溫通經(jīng)絡(luò)組表達(dá)相當(dāng)。⑹各組大鼠胸主動(dòng)脈平滑肌中NF-κB陽性表達(dá)的平均光密度值(IOD)比較:正常組和假手術(shù)組比較，IOD值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，且均較其余各組顯著降低(P＜0.05);模型組較各治療組顯著升高(P＜0.05);卡托普利組較余治療組顯著降低

12、(P＜0.05);溫通經(jīng)絡(luò)組較全方組顯著升高(P＜0.05)，較活血化瘀組顯著降低(P＞0.05)，且較補(bǔ)氣組降低不顯著(P＞0.05)。⑺藥物對(duì)高血壓大鼠胸主動(dòng)脈ICAM-1表達(dá)的影響（免疫組化法）:電鏡下，棕黃色顆粒為NF-κB蛋白陽性表達(dá)，主要分布于血管中膜平滑肌。正常組及假手術(shù)組可見少量的棕黃色顆粒;模型組可見散在分布的大量棕黃色顆粒;經(jīng)治療后，卡托普利組、全方組表達(dá)較模型組明顯減少，補(bǔ)氣組、溫通經(jīng)絡(luò)組、活血化瘀組表達(dá)較模型組有

13、所減少。⑻各組大鼠胸主動(dòng)脈平滑肌中ICAM-1陽性表達(dá)的平均光密度值(IOD)比較:正常組和假手術(shù)組比較，IOD值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，且均較其余各組顯著降低(P＜0.05);模型組較各治療組顯著升高(P＜0.05);卡托普利組較余治療組顯著降低(P＜0.05);溫通經(jīng)絡(luò)組較全方組顯著升高(P＜0.05)，較活血化瘀組顯著降低(P＞0.05)，且較補(bǔ)氣組降低不顯著(P＞0.05)。⑼藥物對(duì)高血壓大鼠胸主動(dòng)脈ICAM-1表達(dá)的

14、影響（western blot法）:正常組和假手術(shù)組比較，IOD值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，且均較其余各組顯著降低(P＜0.05);模型組較各治療組顯著升高(P＜0.05);卡托普利組較余治療組顯著降低(P＜0.05);溫通經(jīng)絡(luò)組較全方組顯著升高(P＜0.05)，較活血化瘀組顯著降低(P＞0.05)，且較補(bǔ)氣組降低不顯著(P＞0.05)。
　　結(jié)論：①不完全結(jié)扎左腎動(dòng)脈的手術(shù)方式，成功制備了腎性高血壓大鼠模型。②蛭龍活血通

15、瘀膠囊及其拆方組分對(duì)腎性高血壓大鼠血管重構(gòu)有明顯治療作用，其作用機(jī)制包括氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)、血管剪切力。③蛭龍活血通瘀膠囊不同拆方組分從不同的方面對(duì)高血壓大鼠血管重構(gòu)發(fā)揮治療作用：補(bǔ)氣組在降低血壓方面作用突出；溫通經(jīng)絡(luò)組:在降低MDA、NF-κB蛋白表達(dá)、ICAM-1蛋白表達(dá)方面作用顯著；活血化瘀組能降低血壓、NF-κB蛋白表達(dá)、ICAM-1蛋白表達(dá)。這說明，蛭龍活血通瘀膠囊其對(duì)腎性高血壓大鼠血管重構(gòu)機(jī)制，可能與其降低血壓、抗氧化應(yīng)激、