蛭龍活血通瘀膠囊對大鼠腎性高血壓的干預研究.pdf

1、目的：通過檢測血清炎癥因子白介素—6（Interleukin—6，IL—6）、腫瘤壞死因子—α（Tumor necrosis factor—α，TNF—α）、C反應蛋白（C—reactive protein，CRP）的含量以及腫瘤壞死因子—α（TNF—α）在心肌組織內(nèi)的表達，探討蛭龍活血通瘀膠囊對大鼠腎性高血壓血壓及心肌損傷的保護機制。 方法：選取2月齡健康雄性SD大鼠80只，隨機分為正常組10只與手術組70只，手術組采用結(jié)扎左

2、側(cè)腎動脈的方法建立腎性高血壓大鼠模型，其中假手術組10只，只分離左側(cè)腎動脈不結(jié)扎，兩周后，通過尾套法測定大鼠收縮壓，收縮壓高于基礎血壓20mmHg，且收縮壓高于115mmHg者被認為造模成功（模型不成功者20只，成功者40只）。造模成功的腎性高血壓大鼠隨機分為高血壓模型對照組（簡稱模型組）、蛭龍活血通瘀膠囊高劑量組（簡稱高劑量組）、蛭龍活血通瘀膠囊中劑量組（簡稱中劑量組）、蛭龍活血通瘀膠囊低劑量組（簡稱低劑量組），普通飼養(yǎng)4周后，大鼠腎

3、性高血壓所致心肌肥厚已形成，分組灌胃，高、中、低劑量組分別給予1．6g/kg、0．8g/kg、0．4g/kg蛭龍活血通瘀膠囊灌胃，1次/日，共八周，其中正常組、假手術組及模型組給予等容量生理飲水灌胃，時間同上。給藥八周后，大鼠稱重，2%的巴比妥鈉45mg/kg經(jīng)腹腔注射麻醉，開胸從下腔靜脈取血3—5ml，靜置4小時，以1500r/min離心10分鐘制備血清，—70℃保存?zhèn)溆?。采用ELISA法測定血清IL—6、TNF—α的濃度，采用放射免

4、疫法測定血清CRP的濃度。取血后立即取出心臟，去除心房、右室游離壁、大血管和心包組織，迅速分離左心室稱重（包括室間隔），計算左室重量指數(shù)=左室濕重／體重（mg/g）。在左室中部切部分心肌用4%多聚甲醛溶液固定，常規(guī)石蠟包埋、切片。HE染色光鏡觀察心肌組織病理學改變。采用免疫組化法檢測心肌組織TNF—α的表達。 結(jié)果：1．一般行為觀察實驗期間，正常組及假手術組大鼠毛色光澤，行動敏捷，對周圍變化反應靈敏。模型組及低劑量組大鼠后期毛色

5、逐漸失去光澤，狀態(tài)萎靡，行動遲緩，倦臥。高劑量組、中劑量組大鼠經(jīng)治療五周后精神狀態(tài)好轉(zhuǎn)，毛色逐漸有光澤。2．蛭龍活血通瘀膠囊對腎性高血壓大鼠血壓的影響①基礎血壓假手術組、模型組、高、中、低劑量組大鼠血壓較正常組比較均無統(tǒng)計學意義（P>0．05）。②手術后兩周血壓假手術組、模型組、高劑量組、中劑量組、低劑量組大鼠的血壓較正常組大鼠的血壓比較，除假手術組變化不大外（P>0．05），其余均明顯增高有統(tǒng)計學意義（P<0．05）。③治療后各組血壓

6、的變化治療八周后，與模型組大鼠的血壓比較，高、中劑量組血壓明顯降低（P<0．05），低劑量組無明顯改變無統(tǒng)計學意義（P>0．05），高劑量組、中劑量組與低劑量組之間比較有明顯差異（P<0．05），但高劑量組與中劑量組之間比較無統(tǒng)計學意義（P>0．05）。3．蛭龍活血通瘀膠囊對大鼠腎性高血壓心肌指數(shù)的影響模型組與正常組、假手術組比較LVB/BW均明顯增高，具有統(tǒng)計學意義（P<0．05），高劑量組、中劑量組及低劑量組與模型組比較前兩者明顯降

7、低具有統(tǒng)計學意義（P<0．05），低劑量組無明顯降低無統(tǒng)計學意義（P>0．05），高劑量組、中劑量組與低劑量組之間比較明顯降低有明顯的統(tǒng)計學意義（P<0．05），高劑量組與中劑量組之間比較無統(tǒng)計學意義（P>0．05）。4．蛭龍活血通瘀膠囊對大鼠腎性高血壓炎癥因子的影響模型組大鼠血清CRP、IL—6及TNF—α較正常組、假手術組明顯升高有統(tǒng)計學意義（P<0．05），假手術組大鼠血清CRP、IL—6及TNF—α與正常組比較無明顯差異無統(tǒng)計學

8、意義（P>0．05），治療后高劑量組、中劑量組和低劑量組大鼠血清CRP、IL—6及TNF—α與模型組比較，高、中劑量組明顯降低有統(tǒng)計學意義（P<0．05），低劑量組無明顯降低無統(tǒng)計學意義（P>0．05），高劑量組、中劑量組與低劑量組之間比較降低有統(tǒng)計學意義（P<0．05），但高劑量組與中劑量組之間比較無統(tǒng)計學意義（P>0．05）。5．心臟病理組織學改變模型組及低劑量組大鼠心肌細胞肥大，部分排列紊亂，周圍出現(xiàn)大量的結(jié)締組織，高劑量組、中劑

9、量組大鼠心肌也有不同程度的心肌細胞肥大，排列紊亂，結(jié)締組織增生但較模型組和低劑量組輕，假手術組與正常組比較未見明顯的病理學改變。6．蛭龍活血通瘀膠囊對心肌組織TNF—α表達的影響模型組大鼠心肌TNF—α表達較正常組、假手術組心肌高有統(tǒng)計學意義（P<0．05），假手術組心肌組織TNF—α表達較正常組心肌無明顯差異無統(tǒng)計學意義（P>0．05），高、中劑量組及低劑量組心肌TNF—α表達與模型組比較，高、中劑量組表達明顯降低有統(tǒng)計學意義（P<0

10、．05），低劑量組降低不明顯無統(tǒng)計學意義（P>0．05），高劑量組、中劑量組與低劑量組之間比較明顯降低有統(tǒng)計學意義（P<0．05），高劑量組與中劑量組之間比較無明顯的統(tǒng)計學意義（P>0．05）。 結(jié)論：1．通過部分結(jié)扎一側(cè)腎動脈致腎動脈狹窄，成功制備了與免疫炎性損傷有關的大鼠腎性高血壓模型。2．蛭龍活血通瘀膠囊具有較好的降低腎性高血壓大鼠的血壓效果；蛭龍活血通瘀膠囊可防止腎性高血壓所致大鼠心肌肥厚，且兩者均具有一定量效關系。3．