蛭龍活血通瘀血膠囊在腰椎間盤突出癥大鼠模型髓核中 PLA2影響程度的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、 目的：觀察蛭龍活血通瘀膠囊對(duì)神經(jīng)根壓迫型及非壓迫型腰椎間盤突出癥(LDH)大鼠的療效,探討其作用機(jī)理及大鼠不同腰椎間盤突出癥類型與PLA2水平的關(guān)系,進(jìn)一步研究腰椎間盤突出癥疼痛的機(jī)理。
方法：購(gòu)買12月齡SD大鼠140只(雌雄各70只),將130只大鼠隨機(jī)分為13 小組(a、b、c、d、e、f、a1、b1、c1、d1、e1、f1、空白組),每小組10只,每組大鼠按1-10編號(hào),剩余10只大鼠備用。a、b、c、d、f小

2、組制作成L5、6左側(cè)脊神經(jīng)根壓迫型腰椎間盤突出癥模型, a1、b1、c1、d1、f1,制作成L5、6左側(cè)脊神經(jīng)根非壓迫型腰椎間盤突出癥模型。a、a1, b、b1、c、c1 組于術(shù)后 14 天分別給予蛭龍活血通瘀膠囊高劑量組、中劑量、低劑量組灌胃,給藥劑量分別為 1.6g/kg/d /只、0.8g/kg/d /只、0.4g/kg/d /只,共灌胃 14 天；d、d1 組術(shù)后 14 天給予生理鹽水,按照0.8g/kg/d /只劑量灌胃；e、

3、e1組為假手術(shù)組,僅將大鼠神經(jīng)根暴露后縫合,術(shù)后14天生理鹽水灌胃,劑量同d、d1組；f、f1組為模型組,不作灌胃處理。觀察指標(biāo)：1、觀察f、f1組造模前3天、造模后7天、14天大鼠左后肢機(jī)械刺激縮爪疼痛閾值及術(shù)后行CT檢查。2、①處死大鼠：空白組、f、f1組于術(shù)后7天、14天按1-10編號(hào)分別處死5只大鼠,提取三組不同處死時(shí)段大鼠腰椎間盤髓核、神經(jīng)根作HE染色圖片,用ELISA法檢測(cè)髓核PLA2的量。②觀察記錄壓迫型、非壓迫型兩組灌胃

4、后7天、14天大鼠左后肢機(jī)械刺激縮爪疼痛閾值,灌胃后7天、14天按編號(hào)處死大鼠各5只,取L5、6左側(cè)髓核及脊神經(jīng)根分別作HE染色圖片及ELISA法檢測(cè)髓顯,跛行未消失,行走時(shí)左后肢可負(fù)重,較術(shù)前有所好轉(zhuǎn),總有效率100%。d1組：大鼠左后肢活動(dòng)功能有輕度恢復(fù),出現(xiàn)左后肢明顯拖曳,跛行未消失,行走時(shí)完全避免左后肢負(fù)重,無(wú)大小便失禁。e1組：灌胃前后左后肢活動(dòng)正常,無(wú)異常改變。灌胃后 14 天：a1 組：大鼠左側(cè)后肢拖曳、跛行完全消失。b1

5、組：左側(cè)后肢拖曳消失,殘留輕度跛行。c1組：左后肢中度拖曳,跛行未消失。d1組：同灌胃7天無(wú)改變。②、灌胃后大鼠左后肢機(jī)械刺激縮爪疼痛閾值：壓迫型組：灌胃后7天,高劑量組閾值上升最快,閾值在(66-83)mmhg之間、中劑量組在(60-65)mmhg之間,兩組閾值較生理鹽水模型組均升高,P<0.01,高、中劑量組相比P<0.01,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,生理鹽水模型組組閾值與術(shù)后7天模型比較,P>0.05,無(wú)顯著差異。假手術(shù)組灌胃前后無(wú)顯著變

6、化,與正常大鼠無(wú)差異。灌胃后14天,高、中、低劑量各組大鼠閾值均較灌胃后7天比較P>0.05,無(wú)明顯升高。非壓迫型組：灌胃后 7 天,高劑量組閾值上升最快,閾值在(63-73)mmhg 之間、中劑量組在(59-68)mmhg之間,兩組閾值較生理鹽水模型組均升高, P<0.01,高劑量組與中劑量組相比P<0.01,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,生理鹽水模型組閾值與術(shù)后7天模型比較,P>0.05,無(wú)顯著差異。假手術(shù)組灌胃前后無(wú)顯著變化,與正常大鼠無(wú)差異

7、。灌胃后14天：高劑量組較灌胃7天比較P<0.01,與假手術(shù)組比較P>0.05,無(wú)顯著差異。中、低劑量組前后比較P>0.05,無(wú)顯著差異。③、灌胃后PLA2值改變情況：壓迫型大鼠模型：灌胃后7天高劑量組PLA2值下降最快,與生理鹽水模型組比較P<0.01,有顯著差異；中劑量組 PLA2 值下降較慢,與高劑量比較 P<0.01,有顯著差異；低劑量組 PLA2 值下降最慢,與生理鹽水模型組比較 P>0.05,無(wú)顯著差異。假手術(shù)組灌胃前后無(wú)變

8、化。灌胃后14天與7天比較：高劑量組、中劑量組、低劑量組P>0.05,無(wú)顯著差異；高劑量組與假手術(shù)組比較P<0.01,有顯著差異。非壓迫型大鼠模型：灌胃后7天高劑量組PLA2值下降最快,與生理鹽水模型組比較P<0.01,有顯著差異；中劑量組PLA2值下降較慢,與高劑量比較 P<0.01,有顯著差異；低劑量組 PLA2 值下降最慢,與生理鹽水模型組比較P>0.05,無(wú)顯著差異。假手術(shù)組灌胃前后無(wú)變化。灌胃后14天：與灌胃后7天比較：高劑量

9、組、中劑量組P<0.01,有顯著差異；低劑量組 P>0.05,無(wú)顯著差異；高劑量組與假手術(shù)組比較,P>0.05,無(wú)顯著差異。
結(jié)論：1、本研究建立的神經(jīng)根壓迫型及非壓迫型腰椎間盤突出癥大鼠模型方法可行。
2、蛭龍活血通瘀膠囊高劑量組能明顯改善大鼠椎間盤突出所致神經(jīng)癥狀及緩解疼痛,其作用機(jī)制可能與降低髓核周圍炎性介質(zhì)PLA2有關(guān)。
3、機(jī)械壓迫和炎性介質(zhì)均是致腰椎間盤突出癥疼痛的原因,炎性介質(zhì)在髓