二甲雙胍預(yù)處理對抗小鼠急性缺血性腦損傷的作用研究.pdf

1、目的:長期服用二甲雙胍可有效降低糖尿病患者的腦卒中發(fā)生率。然而，在腦缺血急性損傷期，二甲雙胍是否具有抗腦缺血損傷作用尚不清楚。本研究擬探討二甲雙胍的抗急性缺血性腦損傷作用及其特征，并初步探索其作用機制。
　　方法:雄性C57BL6小鼠進行永久性或短暫性大腦中動脈阻塞(permanent middlecerebral artery occlusion，pMCAO; transient MCAO，tMCAO)手術(shù)建立腦缺血動物模型。二

2、甲雙胍3，10，30 mg/kg/d分別于MCAO手術(shù)前1，3，7d;或缺血即刻或再灌即刻;或再灌后1，3，6h腹腔注射給藥。MCAO缺血或再灌后12 h，取右側(cè)大腦皮層組織檢測細胞凋亡相關(guān)蛋白、AMPK、pAMPK的表達。MCAO缺血或再灌后24 h檢測腦梗死體積與神經(jīng)癥狀評分。
　　結(jié)果:二甲雙胍10 mg/kg/d預(yù)處理7d與模型組相比能顯著減少pMCAO所致腦梗死體積及神經(jīng)癥狀評分，并有效抑制缺血誘導(dǎo)的細胞凋亡，表現(xiàn)為Bc

3、l-2/Bax比值的升高以及cleaved Caspase-3表達的下降。但二甲雙胍其它劑量，3 mg/kg/d和30mg/kg/d，則沒有神經(jīng)保護作用。當(dāng)二甲雙胍10 mg/kg/d的預(yù)處理時間縮短至3d，其保護作用也相應(yīng)的下降;而當(dāng)預(yù)處理時間縮短至1d或者在缺血即刻給藥時，二甲雙胍的保護作用消失。在短暫性腦缺血tMCAO模型中，預(yù)處理二甲雙胍對缺血再灌誘導(dǎo)的腦組織損傷沒有保護作用。并且，當(dāng)再灌3h后給予二甲雙胍則進一步加重缺血性腦損

4、傷。此外，在缺血的腦組織中，二甲雙胍10 mg/kg/d預(yù)處理7d后，AMPK與pAMPK的表達顯著下調(diào)，而縮短預(yù)處理時間或改變二甲雙胍的給藥劑量或在tMCAO模型中，AMPK與pAMPK表達下降的程度均不顯著。AMPK抑制劑Compound C能夠協(xié)同增強二甲雙胍的抗缺血性腦損傷作用。
　　結(jié)論:本研究發(fā)現(xiàn)在腦缺血損傷急性期，二甲雙胍預(yù)處理是其產(chǎn)生神經(jīng)保護作用所必需的，10 mg/kg/d預(yù)處理7d可顯著減輕缺血性腦損傷;但二甲