不同成熟狀態(tài)下樹突狀細胞與TRAF6間的關系.pdf

1、目的：類風濕關節(jié)炎（Rheumatoid Arthritis, RA）是一種常見的慢性、損傷性自身免疫性疾病，其發(fā)病機制被認為是由于體內免疫平衡打破，體液免疫亢進。樹突狀細胞（Dendritic Cell, DC）是體內抗原提呈能力最強也是唯一能激活初始T細胞誘發(fā)正向免疫應答的細胞，成熟DC被認為在RA的發(fā)病機制中發(fā)揮關鍵作用。腫瘤壞死因子受體相關因子6（tumor necrosis factorreceptor-associated

2、factor6, TRAF6）是DC發(fā)育、生長、成熟的關鍵分子，研究TRAF6與DC成熟程度之間的關系，為將來治療RA提供新的藥物靶點及方向。
　　方法：細胞因子rmGM-CSF、rmIL-4誘導C57小鼠骨髓細胞定向分化為未成熟DC，然后用細胞因子rmGM-CSF、rmIL-4、TNF-?、LPS、FK506分成四組分別誘導DC分化為不同成熟狀態(tài)，用流式細胞儀檢測細胞表面CD80、CD86、MHC-II分子證明DC處于不同成熟程

3、度；ELISA檢測 DC不同成熟狀態(tài)下 IL-12的表達情況；逆轉錄-聚合酶鏈反應（RT-PCR）、蛋白免疫印跡法（Western-blot）檢測各組 DC中 TRAF6的mRNA以及蛋白的表達情況。
　　結果：細胞因子rmGM-CSF、rmIL-4成功誘導骨髓細胞定向分化為DC，四組中表面分子CD80、CD86、MHC-II的表達量都有顯著的統(tǒng)計學差異（P?0.05）,其中以 CD86表現(xiàn)得最為明顯；四組中IL-12的分泌量隨著

4、DC的分化程度越高，分泌量也逐漸增加，組間存在明顯的統(tǒng)計學而差異（P?0.05），D組中IL-12分泌量達到10620.73?276.73 pg/ml；D組中mRNA-TRAF6的表達水平顯著高于其它三組（P<0.01）；B、C兩組之間mRNA-TRAF6的表達無統(tǒng)計學差異，但都高于對照組（A組）（P<0.01）；D組中 TRAF6的蛋白表達量最高，與其它三組有顯著的統(tǒng)計學差異（P<0.01），B、C組與A組比較也存在明顯的統(tǒng)計學差異（