共刺激分子B7-H3在兒童肺炎支原體肺炎炎癥機(jī)制中的作用.pdf

1、目的：分析肺炎支原體肺炎（Mycoplasma Pneumoniae Pneumonia，MPP）患兒外周血可溶性 B7-H3（sB7-H3）及相關(guān)炎癥因子的表達(dá)水平，探討共刺激分子B7-H3在兒童MPP炎癥機(jī)制中的作用；用肺炎支原體脂質(zhì)相關(guān)膜蛋白（lipid-associated membrane proteins，LAMPs）刺激小鼠，并予地塞米松干預(yù)，觀察小鼠肺泡灌洗液（BALF）中相關(guān)炎癥因子的表達(dá)、肺組織病理改變以及地塞米松的

2、干預(yù)作用。
　　方法：選取2015年1月~2015年12月在蘇州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院呼吸科住院治療的MPP患兒108例作為研究對(duì)象，其中輕癥52例，重癥56例。并選取同期外科擇期手術(shù)的40例患兒作為對(duì)照組。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）分別檢測MPP患兒血漿中sB7-H3、IFN-γ、IL-4、IL-17、IL-36α及GM-CSF的表達(dá)水平并分析sB7-H3與各細(xì)胞因子以及病情輕重的關(guān)系；用LAMPs刺激小鼠（P組），同時(shí)設(shè)地塞

3、米松干預(yù)組（D組）及生理鹽水對(duì)照組（N組），分別于刺激后12h、24h、48h收集BALF進(jìn)行細(xì)胞總數(shù)計(jì)數(shù)；用 ELISA法測定小鼠 BALF中 IFN-γ、IL-4、IL-17、GM-CSF的水平；小鼠肺組織石蠟切片行HE染色及B7-H3免疫組化，觀察肺組織炎性細(xì)胞浸潤情況、B7-H3表達(dá)情況及地塞米松干預(yù)作用。
　　結(jié)果：MPP患兒急性期血漿中sB7-H3、IFN-γ、IL-17、IL-36α、GM-CSF的表達(dá)都呈高水平(P

4、均<0.001)，經(jīng)抗MP及抗炎治療后均有不同程度降低，其中sB7-H3、IFN-γ、IL-36α、GM-CSF水平仍高于對(duì)照組(P均<0.05)，而 IL-4表達(dá)呈低水平（P=0.014），治療后升高不明顯（P=0.067）；重癥MPP急性期血漿sB7-H3、IFN-γ、IL-17及GM-CSF水平均高于輕癥MPP組(P均<0.05)；MPP患兒急性期血漿sB7-H3水平與IFN-γ及GM-CSF水平分別呈正相關(guān)(r=0.744和0.

5、703，P<0.001)，與IL-4、IL-17、IL-36α的水平無明顯相關(guān)性（r=0.167,0.181和0.035，P>0.05）。三組小鼠 BALF中細(xì)胞總數(shù)、細(xì)胞因子的表達(dá)、肺組織病理 HE染色及 B7-H3免疫組化在12h及24h時(shí)均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。在48h時(shí)P組BALF中的細(xì)胞總數(shù)明顯高于D組及N組（P均<0.05），D組BALF中細(xì)胞總數(shù)高于N組（P=0.004）。48h時(shí)P組BALF中IFN-γ、GM-C

6、SF、IL-4、IL-17的水平均高于N組（P均<0.05），而IFN-γ、GM-CSF水平又高于D組（P=0.025和0.037）；D組IL-4水平高于N組（P=0.004），而IFN-γ、GM-CSF、IL-17水平與N組比較無明顯差異(P均>0.05)。肺組織病理染色顯示48h時(shí)P組氣道及肺泡周圍炎性細(xì)胞（淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等）浸潤增多；D組炎性細(xì)胞浸潤減輕；N組未見明顯炎性細(xì)胞浸潤。免疫組化顯示48h時(shí)P組B7-H3表達(dá)明顯高于

7、D組及N組（P均<0.05）；D組B7-H3表達(dá)水平高于N組（P=0.004），N組幾乎無表達(dá)。
　　結(jié)論：⑴MPP患兒急性期sB7-H3高表達(dá)，且與IFN-γ及GM-CSF水平分別呈正相關(guān)，提示sB7-H3主要通過調(diào)控Th1細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答及中性粒細(xì)胞增殖在MP感染后的炎癥機(jī)制中起重要作用。⑵重癥MPP組sB7-H3水平高于輕癥MPP組，提示sB7-H3水平與MPP病情嚴(yán)重程度有關(guān)，監(jiān)測sB7-H3水平變化，有助于病情及預(yù)后的