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文檔簡介
1、目的:通過對黔產莪術的顯微、理化特性進行研究,判定黔產莪術是否符合中國藥典要求,從而判定其能否作為莪術原料藥材使用;研究黔產莪術油對人直腸癌SW1463細胞血管內皮生長因子(VEGF)和趨化因子蛋白表達的影響,探討莪術揮發(fā)油對腫瘤血管生成的作用機制。
方法:參照《中國藥典》2010版一部附錄有關顯微、薄層鑒定及吸光度、水分、灰分、浸出物、有效成分含量等檢測方法進行測定。將經水蒸氣蒸餾提取的莪術揮發(fā)油,配制成40、80、120、
2、160、200、240、280μg/mL等不同濃度,采用四氮唑鹽(MTT)比色法檢測不同濃度莪術油干預直腸癌SW1463細胞24、48、72h后對細胞增殖抑制的影響,計算莪術油對細胞的抑制率及IC50;于倒置顯微鏡下觀察不同濃度莪術油對直腸癌SW1463細胞的形態(tài)學影響;采用免疫細胞化學和蛋白免疫印跡法(Western Blot)分別檢測直腸癌SW1463細胞中VEGF、趨化因子IL-8和受體CXCR2、CXCR3蛋白的表達。
3、 結果:黔產莪術符合廣西莪術顯微結構特點,吸光度高于0.45,水分少于14.0%,總灰分低于7.0%,酸不溶性灰分低于2.0%,醇溶性浸出物高于7.0%,揮發(fā)油含量高于1.5%。MTT檢測發(fā)現莪術油對SW1463細胞增殖有一定的抑制作用,并呈劑量依賴性,24、48、72h半數抑制率分別為128.30±9.55、122.93±10.82、120.77±1.61(μg/mL)。莪術油處理直腸癌SW1463細胞24h后,細胞中促血管生成因子V
4、EGF、IL-8、CXCR2蛋白表達量下調,與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),莪術油能抑制腫瘤細胞VEGF、IL-8、CXCR2蛋白的表達;而細胞中抑制血管生成趨化因子CXCR3蛋白表達量上調,與陰性對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),莪術油能促進腫瘤細胞CXCR3蛋白的表達。
結論:
1.黔產莪術顯微、理化特性符合《中國藥典》2010版的規(guī)定;
2.不同濃度黔產莪術揮發(fā)油可抑制直腸癌S
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