循環(huán)lncRNA H19對(duì)乳腺癌的診斷價(jià)值及其遺傳易感性研究.pdf

1、第一部分循環(huán)lncRNA H19對(duì)乳腺癌的潛在診斷價(jià)值
　　目的：探討血漿中l(wèi)ncRNA H19表達(dá)水平及其對(duì)乳腺癌的潛在診斷價(jià)值。方法：首先采用實(shí)時(shí)定量PCR（RT-PCR）方法初步檢測(cè)H19在24例乳腺癌組織和30例乳腺癌血漿中的表達(dá)情況，進(jìn)而擴(kuò)大樣本驗(yàn)證H19在97例乳腺癌患者血漿中的表達(dá)水平并分析血漿H19與臨床病理特征相關(guān)性；隨后采用電化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定法（ECLI）檢測(cè)30例乳腺癌早期患者血漿中CEA、CA153表達(dá)水平

2、，并建立logistic回歸模型分析血漿中H19相對(duì)于傳統(tǒng)標(biāo)記物CEA和CA153對(duì)乳腺癌診斷價(jià)值及3項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合后診斷價(jià)值；最后采用定量PCR的方法檢測(cè)24位乳腺癌患者術(shù)前和術(shù)后血漿中H19表達(dá)水平，以評(píng)價(jià)血漿中的H19對(duì)患者體內(nèi)腫瘤動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)情況。
　　結(jié)果：
　　1、H19在乳腺癌組織和血漿中表達(dá)增高（P均<0.05），且血漿中H19的表達(dá)水平與雌激素受體（ER）、孕激素受體（PR）、c-erbB-2和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移明顯相關(guān)，

3、而與患者年齡、病理類(lèi)型、腫瘤分期及Ki-67不具有相關(guān)性。
　　2、血漿H19對(duì)乳腺癌的診斷效能（AUC=0.81）明顯高于乳腺癌傳統(tǒng)標(biāo)記物 CA153（AUC=0.66，P=0.014）和 CEA（AUC=0.52，P=0.003），且3項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合后診斷效能（AUC=0.84）高于H19單獨(dú)檢測(cè)。
　　3、乳腺癌患者術(shù)后10天血漿H19表達(dá)水平較術(shù)前明顯降低（P=0.0006）。結(jié)論：
　　血漿高表達(dá)的H19可作為乳

4、腺癌診斷和臨床監(jiān)控的一個(gè)潛在的新型生物標(biāo)志物。
　　第二部分長(zhǎng)鏈非編碼RNA H19單核苷酸多態(tài)性與乳腺癌的遺傳易感性
　　目的：研究長(zhǎng)鏈非編碼RNA H19單核苷酸多態(tài)性與乳腺癌遺傳易感性之間的關(guān)系，為乳腺癌的早期診斷、分子靶向治療提供理論依據(jù)。
　　方法：收集乳腺癌初診患者全血標(biāo)本500例，健康對(duì)照組標(biāo)本500例。采用生物信息學(xué)軟件篩選中國(guó)漢族人群中H19的標(biāo)簽SNP，利用限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性聚合酶鏈反應(yīng)方法（ P

5、CR-RFLP），檢測(cè)篩選出的標(biāo)簽 SNP rs3741219、rs217727和 rs2107425并進(jìn)行基因分型，然后利用Hardy-Weinberg定律進(jìn)行平衡性檢驗(yàn)，最后采用卡方檢驗(yàn)和logistic回歸分析來(lái)分析各相關(guān)SNP與乳腺癌發(fā)生的相關(guān)性。
　　結(jié)果：
　　1、乳腺癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)與乳腺癌家族史具有明顯的相關(guān)性（OR=1.72，95％CI=1.20-2.47，P=0.004）。H19 rs217727TT基因型（

6、校正OR=1.38，95%CI=1.06-2.21， P=0.01）和 rs2107425AA基因型（校正 OR=1.58，95%CI=1.12-2.19，P=0.02）可明顯增加乳腺癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。
　　2、H19 rs217727 CT+TT基因型與乳腺癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)明顯與妊娠個(gè)數(shù)相關(guān)，妊娠個(gè)數(shù)>2時(shí)乳腺癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增加（ OR=1.36，95% CI=0.87-1.99， P=0.04），且rs217727 CT+TT基因型與乳

7、腺癌患者ER陽(yáng)性相關(guān)；rs2107425 GA+AA基因型與乳腺癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)明顯與流產(chǎn)個(gè)數(shù)相關(guān)，流產(chǎn)個(gè)數(shù)>2個(gè)可增加乳腺癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)（OR=1.65，95%CI=1.12-3.26，P=0.02），然而rs2107425GA+AA基因型與乳腺癌臨床病理特征不具有相關(guān)性。
　　3、H19rs3741219T>C多態(tài)性位點(diǎn)T-C堿基的改變可能在H19上創(chuàng)建一個(gè)hsa-miR-1539 microRNA結(jié)合位點(diǎn)，從而獲得miRNA與ln