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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
1、研究YAP對(duì)N2a細(xì)胞神經(jīng)軸突生長(zhǎng)的影響,為進(jìn)一步探究YAP在神經(jīng)生物學(xué)方面的作用奠定基礎(chǔ);
2、探明YAP調(diào)控miR-29a表達(dá),調(diào)節(jié)PTEN表達(dá),從而對(duì)細(xì)胞軸突生長(zhǎng)的影響。
方法:
1、以N2a細(xì)胞為研究對(duì)象,高表達(dá)YAP,測(cè)量其miR-29家族的表達(dá)量,并篩選出改變最明顯的一個(gè)miRNA,并檢測(cè)PTEN蛋白的表達(dá);
2、通過(guò)改變miR-29a及YAP,來(lái)檢測(cè)YAP是通過(guò)
2、何途徑來(lái)調(diào)控PTEN蛋白的表達(dá);
3、通過(guò)RT-PCR、細(xì)胞免疫熒光、Western blot觀察YAP對(duì)N2a細(xì)胞軸突的影響。
4、通過(guò)點(diǎn)突變方式驗(yàn)證YAP與miR-29a啟動(dòng)子區(qū)域靶合位點(diǎn)的正確性。
結(jié)果:
1、YAP能夠通過(guò)上調(diào)miR-29a調(diào)控PTEN蛋白,并促進(jìn)神經(jīng)軸突的生長(zhǎng);
2、YAP通過(guò)與miR-29a啟動(dòng)子區(qū)域YAP/TEAD結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合來(lái)上調(diào)miR-29a。
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