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文檔簡介
1、目的:探討甘草苷(liquiritin,LQ)對PC12神經(jīng)細(xì)胞軸突生長作用的影響。
方法:本實(shí)驗(yàn)通過神經(jīng)生長因子(Nerve Growth Factor,NGF)誘導(dǎo)PC12神經(jīng)細(xì)胞建立軸突生長模型;采用四甲基偶氮唑鹽(Methyl Thiazolyl Tetrazolium,MTT)法、培養(yǎng)介質(zhì)乳酸脫氫酶(Lactate Dehydrogenase,LDH)法、基因芯片技術(shù)及RT-PCR法,通過觀察甘草苷對PC12神經(jīng)細(xì)胞
2、軸突生成作用的影響,并初步探討其作用機(jī)制。
結(jié)果:
1. LQ+NGF(5、10、20μg/ml LQ+2 ng/ml NGF)組對PC12神經(jīng)細(xì)胞增殖無影響,而LQ+NGF(50、100μg/ml LQ+2 ng/ml NGF)組與正常細(xì)胞對照組比較明顯抑制PC12神經(jīng)細(xì)胞的增殖(P<0.05)。
2. LQ+NGF(0—20μg/ml LQ+2 ng/ml NGF)組對PC12神經(jīng)細(xì)胞毒性無影響,而LQ
3、+NGF(50、100μg/ml LQ+2 ng/ml NGF)組與正常細(xì)胞對照組比較對PC12神經(jīng)細(xì)胞有明顯的毒性(P<0.05)。
3. LQ(5—100μg/ml LQ)組與正常細(xì)胞對照組比較不能促進(jìn)PC12神經(jīng)細(xì)胞軸突的生長,LQ+NGF(20—100μg/ml LQ+2 ng/ml NGF)組與正常細(xì)胞對照組比較能夠明顯促進(jìn)軸突生長(P<0.05)。
4.利用基因芯片檢測的260多個基因中,LQ對基因表達(dá)的
4、影響較大,與正常細(xì)胞對照組比較,LQ組能對大鼠神經(jīng)細(xì)胞相關(guān)的260多個基因中的25個基因表達(dá)有明顯的誘導(dǎo)作用,上調(diào)倍數(shù)均超過2倍以上,其中Neurog3,Nf1,Notch2,Nmur2,Ntf5基因與神經(jīng)再生、神經(jīng)細(xì)胞的分化、遷移和神經(jīng)突觸的形成有關(guān)。
5.對RT-PCR結(jié)果顯示LQ組與正常對照組比較條帶明顯增強(qiáng),進(jìn)一步驗(yàn)證LQ作用后PC12神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)Neurog3,Nf1,Notch2,Nmur2,Ntf5基因mRNA表達(dá)
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