白細(xì)胞介素-33-ST2軸在乙肝相關(guān)慢加急性肝衰竭中的表達(dá)及作用的研究.pdf

1、目的：研究IL-33/ST2軸在乙肝相關(guān)慢加急性肝衰竭（HBV-ACLF）中的動(dòng)態(tài)表達(dá)，并探討IL-33/ST2軸作為HBV-ACLF患者預(yù)后判斷的生物標(biāo)志物或治療干預(yù)新靶點(diǎn)的可能性。
　　方法：利用ELISA法檢測(cè)健康對(duì)照、慢乙肝及HBV-ACLF患者IL-33和sST2血清水平的動(dòng)態(tài)變化，并收集 HBV-ACLF患者疾病過(guò)程中相關(guān)的臨床資料。D-GalN/LPS腹腔注射誘導(dǎo)急性小鼠肝衰竭，Real-time PCR法和 Wes

2、tern blot法檢測(cè)肝組織內(nèi)IL-33和ST2L的動(dòng)態(tài)改變。免疫組織化學(xué)法了解肝衰竭時(shí)肝內(nèi)IL-33的細(xì)胞來(lái)源。以過(guò)氧化氫誘導(dǎo)L02肝細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷，CCK-8法檢測(cè)IL-33對(duì)氧化應(yīng)激所致細(xì)胞毒性的影響。
　　結(jié)果：ELISA檢測(cè)結(jié)果顯示，健康對(duì)照、慢乙肝及HBV-ACLF患者的血清IL-33基線水平均較低，三組間無(wú)顯著差異。而血清sST2基線水平在三組人群中明顯不同：慢乙肝（34.00±4.55 ng/ml）和HBV-A

3、CLF患者（82.19±7.61 ng/ml）的血清sST2水平明顯高于健康對(duì)照組（9.86±1.10 ng/ml），尤其以HBV-ACLF患者sST2水平最高。對(duì)本研究中入組的HBV-ACLF患者進(jìn)行亞組分析發(fā)現(xiàn)，HBV-ACLF非存活組的血清sST2基線水平顯著高于存活組（101.07±13.30 vs63.59±6.13 ng/ml）（p<0.01）。此外，從基線第一周到第四周非存活患者的血清sST2水平幾乎沒(méi)有發(fā)生變化，始終處于

4、較高水平；而在同一時(shí)期，HBV-ACLF存活患者的血清sST2水平卻發(fā)生了大幅度下降，使得二者的血清 sST2水平進(jìn)一步拉開(kāi)了差距。在此基礎(chǔ)上我們又進(jìn)一步分析了HBV-ACLF組血清sST2水平與最新的ACLF預(yù)后評(píng)分系統(tǒng)的相關(guān)性。結(jié)果顯示，血清sST2水平與CLIF-C OF、CLIF-C ACLF評(píng)分和ACLF分級(jí)呈顯著正相關(guān)。ROC曲線證實(shí)血清sST2水平能較好地預(yù)測(cè)HBV-ACLF患者的6個(gè)月死亡率，并且其預(yù)測(cè)價(jià)值與以上各評(píng)分系

5、統(tǒng)相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。以血清sST2基線水平76ng/ml或第四周時(shí)53ng/ml為臨界值將HBV-ACLF患者分為兩組，我們發(fā)現(xiàn)sST2水平在臨界值以上的患者其6個(gè)月死亡率顯著高于在臨界值以下的患者。在D-GalN/LPS誘導(dǎo)的小鼠肝衰竭模型中，隨著病情進(jìn)展，肝內(nèi)IL-33 mRNA水平不斷升高，在7h達(dá)到高峰。而肝內(nèi)ST2L受體蛋白含量在3h顯著升高，之后開(kāi)始不斷下降，到7h下降至最低。免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示，肝衰竭肝臟內(nèi)IL-33主要

6、表達(dá)于血管內(nèi)皮細(xì)胞和肝血竇細(xì)胞核內(nèi)，與健康小鼠肝內(nèi)IL-33的定位相同。以800 umol/L的過(guò)氧化氫誘導(dǎo)L02肝細(xì)胞發(fā)生氧化應(yīng)激損傷后，用10 ng/mL到400 ng/mL等不同濃度的IL-33處理肝細(xì)胞24h，并不能顯著影響肝細(xì)胞的存活率。
　　結(jié)論：研究證明了IL-33/ST2軸的確參與HBV-ACLF的發(fā)生發(fā)展過(guò)程。并且，血清sST2或可作為新的生物標(biāo)志物用于評(píng)估HBV-ACLF的嚴(yán)重程度、早期預(yù)測(cè)患者的預(yù)后，為早期識(shí)