螺內(nèi)酯對心肌肥厚大鼠白細胞介素-33-ST2通路中可溶性ST2的影響.pdf

1、背景:心肌肥厚是心臟在各種刺激條件下的一種適應性改變，其病理變化包括心肌細胞肥大、間質(zhì)細胞增值及纖維化。臨床上導致心肌肥厚的疾病有原發(fā)或繼發(fā)性高血壓、冠心病、心臟瓣膜病、先天性心臟病等。心肌肥厚是心力衰竭、心律失常和猝死等多種心血管疾病的獨立危險因素，因此了解心肌肥厚發(fā)生、發(fā)展機制，并探討藥物干預措施是心血管領域亟待解決的問題。
　　心肌肥厚相關的信號通路有多條,化學信號與其受體結(jié)合后經(jīng)胞內(nèi)信使轉(zhuǎn)導，激活相應的蛋白激酶，如Ca2+

2、、有絲分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)、蛋白激酶C、Janus激酶、磷脂酰肌醇-3激酶(phosphoinositide3 kinase,PI3K)等，機械信號可刺激血管緊張素Ⅱ、去甲腎上腺素等生長因子的釋放，進一步激活應力感受器并傳遞信號至核內(nèi)。而且各個通路之間交叉形成錯綜復雜的網(wǎng)絡?，F(xiàn)在越來越多的研究表明炎癥或免疫性反應參與心肌肥厚的病理生理過程。
　　白細胞

3、介素33（Interleukin-33,IL-33）是IL-1家族新成員，屬于炎癥性因子。ST2是IL-1受體家族成員，其本質(zhì)是蛋白質(zhì)，主要由心肌細胞及心肌成纖維細胞在壓力超負荷或血流動力學發(fā)生改變時表達，ST2基因通過可變剪接至少編碼3種形式的蛋白質(zhì)：可溶性ST2（soluble ST2,sST2）、跨膜型ST2（transmembrane ST2,ST2L)及可變性ST2(varibleST2,ST2 V)，ST2L和sST2是心臟

4、中ST2的主要表達形式,ST2L作為IL-33的受體被證明在心肌梗死、心臟移植及心力衰竭中發(fā)揮保護作用，而sST2則作為誘騙受體存在?，F(xiàn)研究發(fā)現(xiàn)醛固酮受體拮抗劑可以調(diào)節(jié)IL-33/ST2通路中心肌細胞表達中間產(chǎn)物，增強IL-33與ST2L的結(jié)合，降低sST2濃度，在心肌梗死及心力衰竭中起到抗重構(gòu)作用。
　　目的:本研究通過大鼠皮下注射異丙腎上腺素誘導心肌肥厚模型，觀察心肌肥厚組織中sST2濃度的變化,探討螺內(nèi)酯對IL-33/ST2

5、通路sST2的影響與抗心肌肥厚作用機制。
　　方法:30只健康雄性SD大鼠喂養(yǎng)1周后，按隨機數(shù)表法分為3組（每組10只）：模型組、藥物干預組與對照組。模型組與藥物干預組皮下注射ISO2.5mg/(kg﹒d)；對照組皮下注射相等劑量的生理鹽水，連續(xù)給藥14d。從造模當天起，把螺內(nèi)酯片20mg/(kg﹒d)溶于2 ml生理鹽水中對藥物干預組大鼠灌胃，模型組及對照組用等量生理鹽水灌胃，共8周。8周后稱量3組大鼠體質(zhì)量（body mass

6、,BM），而后處死大鼠，稱取心臟質(zhì)量（heart mass,HM）及左心室質(zhì)量(left ventricle mass,LVM)，計算心臟質(zhì)量指數(shù)（HM/BM）、左心室質(zhì)量指數(shù)（LVM/BM），了解心肌肥厚程度，取心肌組織制備切片進行HE染色觀察心肌組織形態(tài)及心肌細胞直徑，免疫組化法及逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應（Reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR）法檢測心肌組織中sST

7、2的表達。
　　結(jié)果:
　　1.各組大鼠HM/BM、LVM/BM比較
　　心臟質(zhì)量指數(shù)（HW/BW）結(jié)果為：對照組<藥物干預組<模型組（2.47+0.07mg/g vs2.79+0.07mg/g vs3.39+0.11mg/g），組間比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。左心室質(zhì)量指數(shù)（LVM/BM）：對照組<藥物干預組<模型組（1.78+0.07mg/g vs1.92+0.10mg/g vs2.34+0.11mg/g

8、），組間比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　2.各組大鼠心肌組織病理形態(tài)學變化及心肌細胞直徑
　　對照組心肌細胞大小正常，排列整齊規(guī)律；模型組心肌細胞肥大，排列紊亂，可見增生纖維組織；藥物干預組心肌細胞排列較模型組整齊；心肌細胞直徑：對照組<藥物干預組<模型組，組間比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　3.免疫組化法測定sST2含量
　　免疫組化染色后sST2在心肌細胞中顯示棕黃色顆粒，正常心肌細胞

9、中可見少量棕色顆粒，微弱陽性表達；模型組心肌細胞內(nèi)可見大量棕黃色顆粒，強陽性表達；干預組棕黃色顆粒少于模型組，為陽性表達，組間比較有統(tǒng)計學意義。3組大鼠陽性區(qū)平均光密度值比較：對照組<藥物干預組<模型組(0.03±0.02 vs0.15±0.01 vs0.28±0.01,P<0.05)，組間比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　4.大鼠肥厚心肌中sST2mRNA含量
　　RT-PCR法測的3組大鼠心肌細胞中sST2mR

10、NA的相對含量為：對照組<藥物干預組<模型組(0.15±0.01 vs0.18±0.01 vs0.50±0.04,P<0.05)，組間比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　結(jié)論:
　　1.心肌肥厚大鼠心肌組織中sST2的表達升高，說明sST2能夠促進心肌肥厚的形成。
　　2.醛固酮受體拮抗劑螺內(nèi)酯干預后心肌肥厚大鼠組織中sST2的表達低于模型組，心肌肥厚程度也較模型組減輕，說明螺內(nèi)酯可通過降低sST2濃度，增強I