磷脂轉(zhuǎn)運蛋白在煙草誘導RLE-6TN細胞株發(fā)生上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化中的作用.pdf

1、目的：探討磷脂轉(zhuǎn)運蛋白(Phospholipid transfer protein，PLTP)在煙草提取物(Cigarette smoke extract，CSE)誘導大鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞株RLE-6TN發(fā)生上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(Epithelial-mesenchymal transition，EMT)中的作用。
　　方法： RLE-6TN細胞株體外培養(yǎng)24 h，分為4組，每組3孔，分別加入0％，0.25%，0.5%和1% CSE共培養(yǎng)

2、2天，RT-PCR法檢測E-鈣黏蛋白和波形蛋白mRNA表達以及細胞和CSE共培養(yǎng)3天Western blot法檢測PLTP、EMT相關(guān)蛋白（E-鈣黏蛋白、N-鈣黏蛋白和波形蛋白）的表達量。將PLTP-siRNA轉(zhuǎn)染入RLE-6TN中，Western blot法檢測CSE對轉(zhuǎn)染后PLTP和EMT相關(guān)蛋白的影響。
　　結(jié)果：不同濃度的CSE作用后，E-鈣黏蛋白 mRNA分別為（1.01±0.05），（0.74±0.05），（0.65±

3、0.03），（0.30±0.08），呈濃度依賴下降；波形蛋白 mRNA在1%CSE（1.88±0.49）與對照組表達（1.01±0.20）相比增加。PLTP蛋白含量分別為（0.42±0.02），（0.89±0.25），（1.08±0.18），（1.61±0.06）；E-鈣黏蛋白蛋白含量分別為（1.61±0.040），（1.08±0.10），（0.63±0.08），（0.68±0.17）；N-鈣黏蛋白蛋白含量分別為（0.60±0.15），

4、（0.57±0.26），（0.88±0.30），（1.94±0.54）；波形蛋白蛋白含量分別為（0.61±0.05），（0.98±0.16），（1.07±0.14），（1.34±0.19）。與對照組比，1%實驗組差異有統(tǒng)計學意義(均 P<0.05)。PLTP-siRNA和 CSE處理細胞后，E-鈣黏蛋白蛋白表達量較對照組明顯增加（P<0.05），N-鈣黏蛋白和波形蛋白蛋白表達量較對照組明顯降低（P<0.05），PLTP-siRNA可部分