2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩61頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)

文檔簡介

1、目的:
  臨床上,多數(shù)實體惡性腫瘤的硬度高于正常組織,軟堅散結(jié)是中醫(yī)治療惡性腫瘤的重要方法之一。守宮硫酸糖肽是傳統(tǒng)軟堅散結(jié)中藥守宮抗腫瘤的主要有效成份。本課題通過守宮硫酸糖肽對肝癌HepG2細胞的體外研究,探究守宮硫酸糖肽對肝癌HepG2細胞增殖與遷移的影響并初步探討其中的機制。
  方法:
  1.取肝癌HepG2細胞,實驗設(shè)置空白對照組、GSPP低劑量組(20μg/mL)、GSPP中劑量組(100μg/mL)、G

2、SPP高劑量組(200μg/mL)。運用MTS試驗觀察守宮硫酸糖肽對肝癌HepG2細胞增殖的影響,并依據(jù)不同觀察時間點的細胞數(shù)繪制細胞生長曲線。
  2.取肝癌HepG2細胞,實驗分組同上,通過劃痕實驗和Transwell實驗觀察守宮硫酸糖肽對 HepG2細胞遷移的影響。并通過免疫熒光法觀察不同實驗組HepG2細胞內(nèi)E-鈣粘蛋白,Vimentin以及α-SMA表達情況。
  3.取肝癌HepG2細胞,實驗分組同上,通過流式細

3、胞術(shù)檢測HepG2細胞表面整合素β1表達情況,并通過Western-blot實驗檢測細胞內(nèi)E-鈣粘蛋白及p-ERK表達情況。同時,運用RT-PCR實驗檢測細胞內(nèi)整合素信號通路上Rho,Rac, cdc42,Arp3蛋白的表達情況。
  結(jié)果:
  1.MTS法探究守宮硫酸糖肽對HepG2細胞增殖的影響:分別于加藥12h,24h,36h,48h測量每組細胞的OD值。結(jié)果顯示:GSPP高中低劑量組HepG2增殖的細胞數(shù)較空白對照

4、組均明顯較少(P<0.05),并且高劑量(200μg/mL)組對于增殖的抑制作用最強。
  2.(1)劃痕實驗:在加入藥物時和加入藥物12小時后,分別測量不同組別細胞遷移運動的距離。通過觀察圖片和測量細胞遷移的距離我們可以看出,三個劑量守宮硫酸糖肽組 HepG2細胞的遷移距離與空白對照組比較,均明顯減少(P<0.01)。
  (2)Transwell實驗:從穿過Transwell小室膜的細胞數(shù)看,GSPP三個劑量組較空白對照

5、組細胞數(shù)均明顯減少(P<0.01)。并且這種抑制遷移的作用呈劑量依賴性。
  (3)免疫熒光實驗觀察細胞內(nèi)E-鈣粘蛋白,Vimentin與α-SMA的表達情況:守宮硫酸糖肽三個劑量組與對照組比較,HepG2細胞內(nèi)E-鈣粘蛋白表達增加, Vimentin與α-SMA表達減少。
  3.(1)流式細胞術(shù)檢測HepG2細胞表面整合素β1蛋白的表達:與空白對照組比較,加入守宮硫酸糖肽的三個劑量組整合素β1的表達均明顯減少(P<0.0

6、5)。
  (2)通過Western-blot實驗觀察HepG2細胞內(nèi)p-ERK與E-鈣粘蛋白的表達情況:守宮硫酸糖肽三個不同劑量組p-ERK蛋白的表達量均明顯低于空白對照組,而E-鈣粘蛋白的表達量則高于對照組。
  (3)RT-PCR檢測HepG2細胞內(nèi)整合素信號通路上蛋白的表達:加藥組HepG2細胞內(nèi)整合素通路上的 Rho,Rac,cdc42,Arp3蛋白表達量均較空白對照組均明顯減少(P<0.05)。
  結(jié)論:

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論