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文檔簡介
1、目的檢測苦參素(OM)對肝癌細胞株HepG2侵襲、轉移的作用及其對E-cadherin、CD44、MMP2與TIMP2表達的影響,探討其作用的可能分子機制,為苦參素抗肝癌作用提供實驗依據。
方法以體外培養(yǎng)指數生長期人肝癌細胞株HepG2為研究對象。實驗設空白對照組、陰性對照組和OM組,OM組再分為5組(0.5mg/ml、1.0mg/ml、2.0mg/ml、4.0mg/ml及8.0mg/ml)。MTT法測定OM對HepG2細胞增
2、殖的影響作用。細胞劃痕試驗和Transwell小室法檢測HepG2細胞侵襲和遷移能力,Real-time PCR和Western Blot檢測終濃度OM組(1.0m g/ml、2.0m g/ml和4.0 m g/ml)中E-cadherin、CD44、MMP2與TIMP2的表達變化。
結果 MTT法示,隨OM作用時間和藥物濃度的延長和升高,OM對HepG2細胞的增殖抑制作用具有時間和濃度的依賴性,以(1.0mg/ml、2.0m
3、g/ml、4.0mg/ml)三組作用明顯,并選為最終濃度藥物實驗組;劃痕實驗示各終濃度OM組隨藥物濃度的升高,其劃痕傷口愈合的速度越慢;Transwell小室的實驗結果示,各終濃度OM組作用后HepG2細胞侵襲和轉移能力明顯下降(均P<0.05),與陰性對照組相比,并與濃度梯度呈依賴;Real-time PCR和Western Blot檢測結果提示,各終濃度的OM組中E-cadherin、TIMP2的mRNA和蛋白表達均升高,CD44、
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