納米槲皮素對MCF-7及MCF-ADR細(xì)胞耐藥性影響的研究.pdf

1、槲皮素是黃酮類一種具有代表性的化合物，廣泛存在于人類的食物與天然藥物之中，是一種重要的生理活性物質(zhì)，具有價格低廉、安全、無毒、不良反應(yīng)少等優(yōu)點。槲皮素進入體內(nèi)后能與蛋白質(zhì)發(fā)生相互作用，產(chǎn)生降低血脂，抗血小板聚集，擴張冠狀血管，抗炎，抗過敏、調(diào)節(jié)免疫功能、防治慢性退行性疾病等多種生物活性及藥理作用。因此，槲皮素及其衍生物在食品、醫(yī)藥及化妝品等領(lǐng)域具有非常廣泛的應(yīng)用價值。
　　本論文采用自組裝技術(shù)，自下而上制得了納米槲皮素結(jié)晶，該結(jié)晶

2、具有良好的水溶性，其結(jié)構(gòu)經(jīng)過粒徑、ZETA電位、IR和 UV表征；探索了其對 MCF-7及 MCF/ADR細(xì)胞的細(xì)胞毒性；研究了其對上述兩種細(xì)胞耐藥性的影響；及與細(xì)胞耐藥密切相關(guān)的P-糖蛋白的關(guān)系。本論文由四部分組成，主要內(nèi)容如下所示：
　　1、通過考察槲皮素的結(jié)構(gòu)特征，確定了納米槲皮素最優(yōu)的制備方法，采用加堿溶解再通過加酸調(diào)節(jié)pH至中性，制得穩(wěn)定且溶解性良好的槲皮素納米混懸液。該制備方法不需要特殊的儀器設(shè)備和工藝、制備簡單、快捷

3、，制得的納米槲皮素平均粒徑為124 nm，溶液的Zeta電位值為-32.9 mV。并通過紅外及紫外譜圖證實該納米槲皮素分子結(jié)構(gòu)未發(fā)生明顯改變。
　　2、通過納米槲皮素與DMSO溶解的槲皮素對MCF-7和MCF/ADR細(xì)胞的毒性實驗的對比，證實了納米槲皮素對MCF-7和MCF/ADR細(xì)胞具有較低的細(xì)胞毒性作用，其IC50值大于1.5 mg/mL。與DMSO溶解法相比具有更好的溶解性。并且經(jīng)過納米槲皮素處理的MCF-7和MCF/ADR

4、細(xì)胞對阿霉素的耐受性明顯提高。
　　3、采用熒光顯微鏡和流式細(xì)胞儀等熒光分析方法和手段，可以直接和間接觀察檢測到用高濃度槲皮素處理后的MCF-7和MCF/ADR細(xì)胞內(nèi)阿霉素?zé)晒鈴姸鹊臏p弱，說明細(xì)胞內(nèi)阿霉素的含量顯著下降。
　　4、細(xì)胞耐藥性的高低與細(xì)胞膜上P-糖蛋白密切相關(guān)，故用免疫蛋白印跡法研究了經(jīng)高濃度納米槲皮素處理后的MCF-7和 MCF/ADR細(xì)胞上 P-糖蛋白量的變化，發(fā)現(xiàn)高濃度槲皮素確實能誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生更多的P-糖